提取物镇痛.pptxVIP

Antinociceptive Effect of Tetrandrine on LPS-Induced Hyperalgesia via the Inhibition of IKKb Phosphorylation and the COX-2/PGE2 Pathway Plos One3.234Abstract 粉防己碱（TET）是从粉防己提取的双苄基异喹啉类生物碱。具有抗炎和免疫调节作用。我们已经表明，TET能够有效地抑制细菌脂多糖（LPS)诱导的炎症介质产生，包括环氧化酶（COXs）。然而，TET是否对LPS诱导的痛觉过敏有镇痛效应是未知的。在本研究中，我们研究了TET潜在的镇痛作用，并且研究了它对LPS引起的痛觉过敏的镇痛机制。脂多糖能够诱发痛觉过敏，并且诱导血清、脑组织、体外培养的星形胶质细胞中产生PGE2。粉防己碱使得这些症状减弱。LPS使IKKβ激活，同时使NF-κB信号通路中下游基因表达增加，包括COX-2，但是这些表达水平的增加都会被TET显著降低。此外，在星形胶质细胞中，IKKβ降解，IKKα无变化，逆转了TET对于LPS诱导的IκB磷酸化、P65磷酸化及COX2增加。我们的研究发现，TET抑制IKKβ磷酸化，通过IKKb/IkB/NF-kB 通路，使PGE2，COX2等减少，发挥对LPS诱导疼痛的镇痛作用。Introduction炎症介质，比如前列腺素（PGs），PG合成酶，和环氧合酶（COXs），可以导致反常的神经活性，引起疼痛过敏。环氧合酶（COXs）是前列腺素（PGs）合成的限速酶。有COX-1和COX-2两种亚型。COX-1调节正常生理条件，COX-2响应于炎症信号，比如细胞因子和LPS。COX-2由由核因子NF-kB调节，这是一个众所周知的参与炎症或损伤的转录因子。最近的研究显示，NF-kB也与痛觉过敏有关。正常条件下，细胞质中，NF-kB不活跃，并且通过它的亚基P65、P50结合到IkB。在IkB激酶IKK的活化作用下，IkB磷酸化，NF-kB进入细胞核，调节与炎症和疼痛物质相关的基因的转录。Materials and Methods 为了诱导痛觉过敏，将小鼠随机分为对照组（0.1毫升/ 10克无热原的无菌生理盐水，腹腔注射[IP]），LPS组（100mg / kg，IP）低TET+ LPS治疗组（15mg / kg TET，100mg / kg LPS，IP），中度TET+ LPS治疗组（30mg / kg的TET，100mg / kg LPS，IP），高TET+ LPS治疗组（45 mg / kg TET，100mg / kg的LPS，IP），吲哚美辛治疗组（5mg / kg，100mg / kg的LPS，IP），和吗啡治疗组（10mg / kg，100mg / kg的LPS，腹膜内）。 TET，吲哚美辛，或吗啡，是在用LPS注射前30分钟给药。每组至少重复5次。 Materials and Methods热板试验 醋酸扭体实验细胞活力测定实验（mtt,星型胶质细胞）酶免疫测定实验（EIA）western blotsiRNA转染qRT-PCR (逆转录定量PCR)Discussion 脂多糖，革兰氏阴性菌细胞壁的成分，在炎症和感染的过程中激活多种细胞信号。除了引起内毒素休克，较低剂量的脂多糖能够引起小鼠痛觉过敏。脂多糖单一剂量给予中枢或者外周，能够降低机械疼痛阈值从而引起痛觉过敏。在这项研究中，我们给予BALB/C小鼠脂多糖，诱导痛觉过敏模型。脂多糖诱导 的痛觉过敏，通过热板实验小鼠开始舔爪时间的缩短以及醋酸诱导的扭体实验中扭体次数的增加，得到了证实。扭体模型对非甾体类抗炎药物的镇痛作用敏感，包括吲哚美辛，热板法集中于脊髓水平的病理生理过程，我们选择吲哚美辛和吗啡分别作为扭体实验和热板实验的阳性对照药。 DiscussionTET剂量依赖性地减少脂多糖诱导的小鼠模型在热板实验和扭体实验中的疼痛反应，说明TET兼具中枢和外周镇痛作用。因为PGE2是一个主要的促炎症因子和疼痛因子，我们检测了它在体内外的含量。在小鼠血清，脑组织，人工培养的星形胶质细胞中，PGE2在用脂多糖和TET处理时，分别显著增加和显著降低。这说明PGE2在LPS诱导疼痛和TET抑制疼痛的过程中，起关键作用。COXS是调节花生四烯酸合成PGE2的关键酶。脂多糖增加了小鼠脑组织和星形胶质细胞中COX2的表达。但对COX1没有影响。小鼠模型和细胞实验显示， COX2对于PGE2的产生起到关键的调节作用。这些结果表明，PGE 2/ COX-2是痛觉过敏合适的中间路径。TET还引发了中枢和外周的PGE 2/ COX-2比例下降。Discussion 星形胶质细胞调节疼痛的关键作用，通过相关动物模型和患者疼痛的研究证实。通过激活