第九章基因工程和基因组学分析.ppt

浙 江 大 学 遗传学第十一章 第九章　基因工程和基因组学 第一节 基因工程 2008年全世界主要转基因作物的种植面积和比例（百万公顷） 各国转基因作物种植面积比较 转基因花卉 如：转基因康乃馨、 矮牵牛等 第二节　基因组学 国际水稻基因组测序计划 　　国际水稻（粳稻）基因组计划始于1998年，日、美、中、法等 国家和地区参加，我国对测序计划的贡献率为20% 。 　　2005年8月10日，《Nature》宣布历时6年半的水稻全基因组测序 完成　?　水稻12条染色体上37544个基因的精确位置（遗传图谱）， 误差率0.01%　?　是高等动植物中第一个完成着丝点测序。 　　基因组计划研究开始于1990年。 　　美国启动被誉为“人体阿波罗计划”的“人类基因组 计划” ，投资30亿美元，计划历时15年?测定人类基因 组的30亿个核苷酸对的排列次序?构建高分辨率的人类 基因组遗传图谱和物理 图谱?发展生物信息学。 　　2001年12月14日，美、英等国科学家宣布绘制出 拟南芥基因组的完整图谱。 　　在美国提出人类基因组计划后，日本等国和中国 分别启动了“水稻基因组计划” 。 　　2002年4月5日《Science》刊登中国独立完成 的水稻基因组草图序列（总数：4.6亿），是继 人类基因组工作草图之后完成测定的最大基因组 ? 2005年完成全基因组精细图。 　　材料：籼稻“9311” ，2001年7月启动。 　　完成单位：华大基因研究中心、中科院遗传 与发育生物学研究所等12个单位。 　　水平：水稻基因组的总基因数约为3.8~4.0万个。 　　方法：“鸟枪射击法”，利用国产曙光2000、曙光3000超级计算 机（1000亿次/秒）对随机DNA碎片进行排序和组装，确定其在基因 组的正确位置。 　　计划：功能基因分析和蛋白质研究。 2002年12月21日《Nature》发表中国独立 绘制完成粳稻因组第四号染色体精确测序图。 　　材料：粳稻“日本晴”。 　　完成单位：中科院国家基因研究中心等4家单位。 　　水平：第四号染色体中的总碱基数目为0.35亿碱基对，覆盖了 该染色体全长序列98％的区域，只剩下7个小空洞，碱基序列的精 确度达到99.99%。完整测定着丝粒序列在高等生物中属于首次。 　　计划：对预测鉴定的4658个基因作进一步分析，并对着丝粒功能等作研究。 2004年3月1日，科学家宣布绘制完成首幅 禽鸟类物种的基因组序列草图。 　　材料：红原鸡（鸡的远祖）。 　　完成单位：中国、美国、德国、英国、瑞典、荷兰等。 　　水平：总碱基数目约为10亿碱基对，该序列草图与人类基因组序列进行了并列比较（由美国华盛顿大学负责）。同时完成一张鸡遗传差异图谱（由中科院负责），对红原鸡、肉鸡（英）、蛋鸡（瑞典）、乌鸡（中）进行序列差别分析。 　　作用：鸡是研究低等脊椎动物和人类等哺乳动物的理想中介，因此在禽流感防治、改善家禽和人类健康等方面有明显应用价值。 1. 根癌农杆菌转化技术： 　　根癌农杆菌介导的植物转化技术应用最早（双子叶 植物 ? 单子叶植物）。 　　过程：将目的基因与启动子（花椰菜病毒35S）及 终止子组成嵌合DNA分子?插入到Ti衍生质粒RB与LB 内构成重组质粒　?　转化农杆菌细胞　?　利用重组农杆菌 去感染植物细胞 ?　使质粒部分DNA包括目的基因，整合 到植物染色体，实现　?遗传转化。 　　利用抗草甘膦（glyphosate） E. coli中分离克隆的 EPSP合成酶基因　?　培育出高抗除草剂转基因植物。 农杆菌转化法： 2. 基因枪转化技术： 　　以高压气体为动力，高速发射包裹有重组DNA的金属 颗粒?将目的基因直接导入植物细胞?整合到染色体上。 　　转化的载体多以 pUC系列质粒为基础构建?通常具有 细菌复制原点及抗性选择标记、可在植物中 表达的启动子终止子及调控序列、植物抗性 选择标记（如除草剂、潮霉素等抗性）。 　　不同基因枪类型的共同特点：是用一种动力系统将金属 微粒和包被DNA导入受体细胞或组织进行转化。 　1. 位于高压气体桶底部 　　的爆破片； 　2. 载有重组DNA和金属 　　微粒的大载体； 　3. 阻挡板； 　4. 包裹有重组 DNA 　　的金属微粒； 　5. 被轰击样品。 抽真空 3. 受精卵细胞注射法 转基因牛：受精卵注射法 　　目前，基因工程研究发展迅速，已取得一系列重大 突破。基因工程技术已广泛用于工业、农业、畜牧业、 医学、法学等领域，为人类创造了巨大的财富。 六、基因工程的应用： 具有生长激素的转基因鼠 ㈠、基因工程工业： 　　最早应用基因工 程生产人的蛋白质的 方法是在细菌中表达 人的胰岛素（1982）。 　　基因工程生产人 的胰岛素的方