4 如何做好动物实验课件.ppt

安乐死注意事项： 死亡时尽可能减少惊恐、疼痛。 使其在最短时间内失去意识迅速死亡。 方法可靠。 对操作人员安全。 采用的方法要与研究的要求和目的一致。 对观察者和操作者的情绪影响最小。 对环境污染的影响最小。 需要的机械设备 简单，价廉，易操作。 处死动物的地点应远离并与动物房分开。 安乐死的方法 化学药物：巴比妥酸盐类、无爆炸性吸入 麻醉剂类（CO2气体） 物理学方法：颈椎脱臼法、断头法和击晕 穿刺法 CO2 8、病理解剖取材技术 背景资料记录 实验动物种类、年龄、性别、原编号、体重等 剖检时间、地点、安乐死方法、解剖者 其它：剖检前禁食时间（一般12小时） 取材基本要求： 通常选择正常与病变交界处组织， 相同器官组织取材时，选材部位应尽量一致， 胃肠标本应将内容物冲洗干净， 薄厚适当，一般3-5mm，大小为1.5-2cm2 取材时勿挤压组织块， 用于体外培养的病理取材要严格无菌操作。 9、行为学研究技术 自主活动度检测：矿场试验 协调运动、体能和肌力检测：滚轴试验、平衡木测试、直杆实验、足迹分析法、楼梯实验等 认知行为检测：Morris水迷宫、T形迷宫、八臂迷宫、高架十字迷宫等 激惹度检测：悬尾实验 动物寒热性质的行为学检测：热板实验等 。 将啮齿类或其它动物移出动物设施用于实验（如影像学或行为学实验）时，根据动物群体的健康状况，并且遵照已有的动物生物安全计划，需要将移出的动物与原群体分开饲养。 稳定期，不管动物是否需要被隔离，新进动物在使用前，都应有一段生理、心理和营养条件的稳定期。 稳定期根据动物运输的方式和时间、种类和预定用途而定。 1、辨别雌雄 根据排泄孔和生殖孔的距离辨别。 距离近的为雌性，距离远的为雄性 2、标记方法 （1）染色法：染料有：苦味酸（黄）、碱性品 红（红）、亚甲兰（兰）、龙胆紫（紫） （2）耳标法： （3）挂牌法 （4） 剪毛法 （5） 烙印法 （6） 电子芯片（玻璃管标签）植入法 在采集样品、更换笼具、转移动物时，必须要抓取并保定动物。学习抓取与保定动物的目的是为了便于操作、保证实验人员安全、防止动物意外损伤。实验人员在进行动物实验时，必须正确抓取动物，禁止对动物采取突然、粗暴的方法，以免被动物咬伤或造成动物伤亡和应激反应。在抓取与固定时，首先应慢慢友好地接近动物，注意观察动物的表情，等动物安静下来时抓取，抓取动作应准确、迅速、熟练、温柔。必要时实验人员应戴上防护用具。 小鼠的抓取与固定 大鼠的抓取与固定 家兔的抓取与固定 犬的抓取与固定 猴的抓取与固定 小型猪的抓取与固定 疼痛与止痛 痛：因组织伤害导致真实的或潜在的官感上的不愉快。 止痛：用药物或其他方法使动物没有痛的感觉 “Well, that explains the pain!” Gary Larson ~1985 动物会否有疼痛？ 没有直接的证据 行为反应 在人类能引起疼痛的类推给动物 为何要处理疼痛 法规及道德的理由 动物利益 有利于研究成果 快速回复正常的生理功能 较高的生活率 对生理状态的影响减少 疼痛存在： 抓取固定 实验操作 实验后恢复 麻醉概述 麻醉：显著抑制感觉意识和运动反射，使感觉处于迟钝状态，是可控制或有可逆性。 镇痛：短暂地消除或降低痛苦的感觉 麻醉一般分为全身麻醉和局部麻醉。 全身麻醉分四期：随意兴奋期、不随意兴奋期、外科麻醉期、延髓麻痹期 实验动物的麻醉方法和麻醉药 平衡-复合镇痛，种属差异，个体差异 性情，脂肪，病史，营养及健康状况 药物剂量与浓度，动物大小，年龄，健康状况，操作需要，严密监控 麻醉前的准备：减轻压力，精确剂量，禁食，麻醉方案，术前用药/麻醉诱导/维持 注意手术合并症 术后监控疼痛及痛苦，麻醉后兴奋，关怀 根据动物体重、麻醉剂量、麻醉药浓度计算麻醉药用量 记录给药、进入兴奋期、麻醉期的时间。 小鼠常用麻醉药的剂量及注射途径 动 物 给药途径 盐酸氯胺酮 戊巴比妥 硫喷妥钠 水合氯醛 小鼠 i.v i.P i.m 22～44 35 50 25 50 400 单位：mg/kg i.v－静脉注射；i.p－腹腔注射；i.m－肌肉注射 大鼠常用麻醉药的剂量及注射途径 动 物 给药途径 盐酸氯胺酮 戊巴比妥 硫喷妥钠 水合氯醛 乌拉坦 大鼠 i.V i.P i.m 22～44 25 50 20 40 400 1100 单位：mg/kg i.v－静脉注射；i.p－腹腔注射；i.m－肌肉注射 （1）经口给药 自动口服给药