基础微生物学课件46课件.ppt

2.转导的种类 完全普遍转导 普遍转导 流产普遍转导 转导 低频转导 局限转导 高频转导 （1） 普遍性转导（generalized transduction） 定义：通过完全缺陷噬菌体对供体菌任何DNA小片段的“误包”而实现其遗传性状传递至受体菌的转导现象，称为普遍性转导。 1.1完全(普遍性)转导：complete transduction。1952年发现，在Salmonella typhimurium中存在转导现象。在它的完全普遍性转导实验中： 以其野生型菌株作为供体菌 营养缺陷型菌株作为受体菌 P22噬菌体作为转导媒介，对供体菌是烈性噬菌体，对受体菌是温和噬菌体 过程： 供体菌 正常噬菌体 + 完全缺陷噬菌体 少量裂解物 + 大量受体菌 遗传稳定的转导子 完全普遍转导 （1） 普遍性转导（generalized transduction） 过程： P22在供体菌内增殖时，宿主的核染色体组断裂，待噬菌体成熟与包装之际，极少数（10 – 6 ~10 – 8）噬菌体的衣壳将与噬菌体头部核心大小相似的一段供体DNA片段误包入其中，形成了一个完全不含噬菌体自身DNA的缺陷噬菌体。 供体菌裂解时，如把少量裂解物与大量受体菌群体相混，使其感染复数（m.o.i）1，这种完全缺陷噬菌体就会将这一外源DNA片段导入受体细胞内。 在这种情况下，由于一个受体细胞只感染了一个完全缺陷噬菌体，故受体细胞不会发生往常的溶原化，也不显示其免疫性，更不会裂解和产生正常的噬菌体；而由于导入的外源DNA片段可与受体细胞核染色体组上的同源区段配对，在通过双交换而整合到受体菌染色体组中，所以使后者成为一个遗传性状稳定的转导子。 一个稳定的转导子的形成 1.2流产普遍性转导（abortive transduction） 概念：受体菌经转导获得的供体DNA片段在受体菌中不发生配对、交换和整合，也不迅速消失，而只是进行转录和转译（性状表达），这种现象就称为流产转导。 现象：发生流产转导的细胞在其进行细胞分裂后，只能将这段外源DNA分配给一个子细胞，而另一子细胞仅获得供体基因的产物——酶，在表型上表现出轻微的供体菌特征，每经过一次分裂，就受到一次稀释， 2. 局限性转导 定义：通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并获得表达的转导现象。 特点： ●噬菌体对供体菌和受体菌都是温和噬菌体 ●只能转导供体菌的个别特定基因（一般为噬菌体整合位点两侧的基因） ●该特定基因由部分缺陷的噬菌体携带 缺陷噬菌体使由于其在形成过程中所发生的低频率（约10 – 5）“误切”，或由于双重溶源菌的裂解而形成（约形成50%缺陷噬菌体） 分类：低频转导与高频转导 转导的过程 2.1低频转导（LFT，low frequency transduction） 一般的转导现象中，从宿主染色体上切离时发生不正常切离的频率极低，故这种裂解物中的部分缺陷噬菌体的比例是极低的（10 – 4 ~ 10 – 6）。把这种裂解物称为LFT（低频转导）裂解物 。 用LFT裂解物以低 m. o. i（感染复数）感染宿主，就可获得极少量的局限转导子，即低频转导。 2.2高频转导（HFT，high frequency transduction） 当用LFT裂解物以高m. o. i 感染E. coli gal–（不发酵半乳糖的营养缺陷型）菌株时，凡是感染有λdgal噬菌体任一细胞，几乎都同时感染有正常的 λ 噬菌体。这时λ 与λdgal同时整合在一个受体菌的核染色体组上，从而使它成为一个双重溶源菌（double lysogen）。当双重溶源菌被紫外线等诱导时，其中的正常λ 噬菌体的基因可补偿λdgal缺失的部分基因功能，因而两种噬菌体就同时获得复制的机会。所以在双重溶源菌中的正常λ 噬菌体被称为助体（或辅助）噬菌体（helper phage）。 双重溶源菌