实验 维生素C测课件.pptVIP

实验四 维生素C测定 固蓝盐B分光光度法 【实验目的】 掌握固蓝盐B分光光度法测定维生素C的原理； 2. 熟悉固蓝盐B分光光度法测定维生素C的测定方法。 【实验原理】 在乙酸溶液中，维生素C与固蓝盐B反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物。在420nm处测定吸光度，与标准系列比较定量。 仪器 紫外可见分光光度计 试剂 乙酸锌溶液： 亚铁氰化钾溶液： 乙酸溶液（2mol/L）： 乙酸溶液（0.5mol/L）： 乙二胺四乙酸二钠溶液（0.25mol/L）； 固蓝盐B溶液（2g/L）： 抗坏血酸标准储备溶液（2.0g/L）： 抗坏血酸标准储备溶液（0.1g/L）：（临用时配制）。 【方法】 1.基本步骤：用框或图形表示流程。 2.操作： （1）试样溶液的制备 蔬菜、水果: 称取鲜样可食部分600g猕猴桃于捣碎机中，加等量的乙酸溶液（2mol/L），捣碎、混匀。 取20ml均浆至100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 滤纸过滤，滤液备用。不易过滤的试样可用离心机离心后，上清液供测定。 （2）样品测定 （2）样品测定 将上述10个管，静置20分钟以后，用1cm比色皿，以标准0管调节零点，在分光光度计420nm处测定各标准管的吸光度。以测出的吸光度对维生素C含量绘制标准曲线或计算回归方程。 计算? X─样品中抗坏血酸含量，单位为mg/Kg A─测定液吸光度　　　 m──试样质量,单位为g 【注意事项】 1. 抗坏血酸有较强的还原性，很容易被氧化，因此操作过程要迅速，并尽量避免与金属离子接触。 2. 本法适用于各类食品中还原型抗坏血酸的测定，不适用于脱氢型抗坏血酸的测定。 【检测结果意义】 维生素C促进体内胶原的形成，促进铁的吸收，降低血胆固醇，减缓动脉粥样硬化，增强免疫力，促进伤口愈合，具有防癌抗癌的作用；缺乏时可引起牙龈出血、皮肤出现淤血点、骨钙化不正常、伤口愈合缓慢、出现坏血病。 * * 各0. 5ml 0.5mol/L乙酸溶液 各0.3ml（摇匀） 乙二胺四乙酸二钠溶液 20ml 2.0ml 1.5ml 1.0ml 0.8ml 0.6ml 0.4ml 0.2ml 0ml vitaC标使液 样品 9 7 6 5 4 3 2 1 管号 至10ml ，混匀 蒸馏水 各1.25ml 固蓝盐B溶液摇匀