荧光检测复习题参考答案..docVIP

荧光检测在医学实验中的应用–复习题 第一章总论荧光的发生及基本检测原理 1何谓发光？ 分子吸收辐射被激发后以光的形式释放，辐射跃迁而衰变回到电子基态→发光 2荧光与磷光的区别？ 荧光：激发后马上发光，第一电子激发单重态辐射跃迁；延迟10-9～10-7秒后。基态S0→单重态S1、S2跃迁→基态。磷光：延迟时间长，几毫秒或更长10-3～10秒电子自旋未配对进入受激三重态，三重态→跃迁→基态 3完成良好荧光检测的有关条件？ 1）选择相应的激发波长2）选择足够强度的激发光源，荧光强度与入射光强度成正比If＝φfI0(1-It/I0)；3）选择合适(QE)的发射波长检测器件；4）控制好样品制备与检测环境体系。 4荧光的种类 根据激发方式。1）光化发光2）化学荧光3）生物荧光。 按荧光素的标记过程可分为：1）免疫荧光2）组织荧光3）诱导荧光 5有哪几种荧光现象？ I次荧光现象：固有或自发荧光；一经辐射就可发出荧光的物质。II次荧光现象及荧光色素(标记物)又称继发荧光；样品分子不能或只能发出很弱的荧光，对此类分子需先经荧光色素标记结合或插入到不发光的大分子中去，根据荧光探针的荧光分析大分子。 6影响荧光强度（If）的因素 1光化分解：荧光物质吸收光能后，某些键断裂，导致荧光弱。制片时应避光。2荧光淬灭：（1）温度淬灭：加快震动弛豫而丧失振动能量；增加分子热运动高温荧光分子与液基环境中分子碰撞。温