生物氧化——电子传递和氧化磷酸化作用课件.ppt

第24章 生物氧化——电子传递和氧化磷酸化作用 一、氧化－还原电势 反应物和产物浓度与电动势的关系式 氧化还原反应的ε判据 二、电子传递和氧化磷酸化 线粒体结构图 还原型辅酶中的能量 电子传递的方向 电子传递形成跨膜的质子梯度 电子传递链 电子传递链标准氧还电势、自由能变化和ATP形成部位示意图 上半图 下半图 Protein Complexes of the Mitochondrial Electron-Transport Chain 电子传递链各个成员 三种类型的Fe-S cluster NADH-Q还原酶催化的电子传递 电子传递链各个成员 辅酶Q的结构和氧化还原态 辅酶Q的space-filling模型 电子传递链各个成员 琥珀酸－Q还原酶催化的电子传递 电子传递链各个成员 细胞色素（cytochrome) B型和C型血红素的结构 还原型细胞色素c的光吸收峰 几种细胞色素的最大吸收峰 细胞色素还原酶催化的电子传递 细胞色素还原酶催化的电子传递 电子传递链各个成员 细胞色素c 的三维结构 电子传递链各个成员 细胞色素氧化酶的传递电子作用 氧与a3及CuB结合的关系示意图 电子传递给氧生成水 电子传递的抑制效应 电子传递链中的抑制剂 三、氧化磷酸化作用 P/O比 ATP的合成部位 亚线粒体的电镜照片 ATP合酶简图 ATP合酶重组实验 能量偶联假说Ⅰ 能量偶联假说Ⅱ 能量偶联假说Ⅲ 化学渗透假说的原理图 化学渗透假说的实验证据 质子梯度驱动合成ATP的实验证明 Peter Mitchell 质子泵出是需能过程 质子转移的两种假设机制 氧还－回路机制示意图 质子转移的两种假设机制 合成ATP与跨膜质子的数量关系 电子传递与质子泵出相偶联 线粒体跨内膜的质子梯度 F1和Fo的亚基组成 ATP合成与蛋白质构象变化 α3β3的不对称结构 分子马达 ATP合酶的结构和工作原理 质子从膜外侧返回内侧的通道 ATP合酶的β亚基构象循环变化与ATP合成 F1Fo ATP合酶的抑制剂 氧化磷酸化的解偶联和抑制 氧化磷酸化的解偶联和抑制 寡霉素对线粒体氧消耗的抑制作用 氧化磷酸化的解偶联和抑制 细胞溶胶内NADH的再氧化 细胞溶胶内NADH的再氧化 氧化磷酸化的调控 线粒体呼吸的几种状态 呼吸控制值的意义 1分子葡萄糖彻底氧化产生的ATP数 Rotation of the g subunit and the ring of c subunits in in the FoF1 complex as directly observed by in vitro studies using fluorescence microscopy: they rotate in 120-degree increments,with each step consume one ATP; operation efficiency near 100%. c转子每一个亚基上有一个重要的残基Asp61，将这个Asp突变成Asn将失去ATP合酶活性。c转子相对于定子的旋转可能依赖于Asp61上负电荷的中和。质子从a亚基的胞质溶胶侧的通道进入，质子化Asp61，推动转子旋转，直到到达a亚基的基质侧质子通道，Asp61上的质子再解离通过此通道进入膜内侧。这样的旋转能够引起γ亚基相对于(αβ)3复合体旋转，导致3个β亚基依次发生构象变化。 Model of the E. coli ATP synthase: the proton gradient drives the rotation of the c ring using two half-channels on the a subunit. (3ATP made per 10-14 protons transported: ~3H+/ATP.) ADP+Pi ADP+Pi Energy Paul Boyer和John Walker因上述发现共享了1997年的诺贝尔化学奖。 在ATP合酶的柄部有一种寡霉素敏感性授予蛋白（oligomycin-sensitivity-conferring protein，OSCP），这种蛋白使复合体对寡霉素敏感，使得寡霉素抑制ATP的合成。Fo的名称即来自于此。 二环己基碳二亚胺（dicyclohexylcarbodi-imide，DCCD）能够修饰Fo蛋白中某亚基的Glu残基，导致抑制质子通过Fo，这种能被DCCD修饰的蛋白又称为DCCD－结合蛋白。 1．解偶联剂（uncouplers） 解偶联剂的作用是将膜外侧的质子运到膜内侧，破坏质子梯度，导致不能合成ATP，但不影响电子传递。 2．氧化磷酸化抑制剂（i