中草药对双歧杆菌生长的影响.docVIP

中草药对双歧杆菌生长的影响 提要本文选用15种传统杭衰老中药对双吱杆菌进行了体外生长促进实验。结果发现刺五加、五味子、宁夏构祀子及阿胶对婴儿双吱杆菌有明显的促进作用。 双歧杆菌是一类多形态、无芽胞革兰氏阳性杆菌。该菌营养要求高，需要外源性生长因子，即双歧因子。该因子能刺激双歧杆菌的生长。现已证实双歧杆菌因子有两种，一种是含有N一乙酞葡萄糖胺的多聚物，另一种是寡聚糖〔‘’。本文旨在探讨阿胶，五味子，构祀及刺五加对双歧杆菌的生长的促进作用。 100毫升，蒸溶，备用。 1. 4中药纸片:用国产新华1号滤 纸，打孔制成直径6mm纸片。干燥灭菌 (1200C )2小时。每100张纸片加lml中 药液，使其浸匀，再分别置无菌平皿在 37℃烘干〔，，。 1材料与方法 1. 1主要仪器:721分光光度计 (四川分析仪器厂)、超净工作台、厌氧培 养系统、Olympus双目显微镜(日本)、 麦氏比浊管。 1. 2菌株:实验所用菌株为婴儿双 歧杆菌Bif 1104，由中国预防医学中心流 行病微生物研究所提供。实验时，取该菌 接种于BL肉汤和BL血平板，置厌氧 罐，用抽气换气法进行厌氧培养。35℃经 48小时培养后，用无菌盐水洗三次，每 次2000 X g离心15分钟，用麦氏比浊管 调整菌液浓度为1. 5亿/ml备用。 1. 3中药:本试验采用的中药为阿 胶，五味子，刺五加，构祀等均购自重庆 市中药材公司。试验时，取五味子、人参、 菌灵芝、熟地、黄精、黄蔑、获等、天冬、营 蒲、何首乌、杜仲、冤丝子、刺五加、构祀 各50克，分别各加水200毫升，置300 瓦电炉上加热煮沸1小时，最后浓缩制 成100毫升药液。取30克阿胶，加水 2实验方法 2. 1纸片法:取上述制备好的菌液 用一定大小的棉签均匀涂布于BL血平 板上。涂布的细菌量以不完全融合生长 为宜，然后贴上上述中药纸片，每个平皿 贴4片，用1个平皿作对照(贴有不含中 药纸片)。厌氧培养35 0C 48小时后，观察 细菌生长情况，涂片，革兰氏染色，油镜 镜检。 2. 2试管法:用接种环取上述制备 菌液2接种环至lOmIBL肉汤培养基 内，然后分别加入中药浓缩液。.1毫升， 另取一支不加中药作对照.厌氧培养 35 0C 48小时后，观察细菌生长情况，涂 片，染色，镜检，证实为革兰氏阳性杆菌， 有分叉等后，再于721分光光度计比浊 测定各管光密度(波长650mm，光径 lcm )。计算各管菌液浓度。 3结果 3. 1纸片法结果 经厌氧培养350C48小时后，发现贴 有阿胶，刺五加，五味子，构祀四味中药 中国徽生态学杂志1996年第a卷第2期 的纸片周围细菌生长极为茂盛，有酸臭 味，呈菌苔生长，菌苔呈灰色，平板由红 色变为巧克力色.涂片，革兰氏染色发现 上述四味中药纸片周围细菌染色典型， 菌体粗大。 3. 2试管法结果 表1各味中药对双吱杆菌生长作用 的影响 光密度(OD)细菌数(mg/ml) 培养基对照 五味子 刺五加 人参 菌灵芝 熟地 0. 45 0. 23 4. 58 3. 75 0. 38 0. 42 1. 91 3. 17 0. 4 2 0. 42 3. 50 3. 50 3. 50 门01了n，目1二 心.几月0 UdO曰‘， ..… ︸.二︸.几，目n乙七以 0. 14 o. zo 精蔑等冬 黄黄获夭 以0. 百瀚 何首乌 o. o. 35 ss 杜仲 冤丝子 0. 42 0. 32 3. 50 2. s7 从以上实验结果可以看出，阿胶，五 味子，拘祀，刺五加这四味中药能促进双 歧杆菌的生长，分别比对照组高出百分 率为75.800,50%,40.5%和21. 7 0 o 0 4讨论 双歧杆菌营养要求高，因此，在体外 培养中许多物质对双歧杆菌有影响. Poch}”的试验表明，除青春双歧杆菌和 长双歧杆菌能在人工培基上生长外，所 有其它的双歧杆菌在体外培养中均需添 加生长促进剂. 双歧杆菌在含有牛奶的人工培养基 上生长良好〔‘，。但BalmerS〕指出，尽管 不少学者在使用牛奶代替人乳这方面作 出了许多努力，但母乳喂养与人工喂养 婴儿肠道内双歧杆菌数量仍存在较大差 别。他发现乳清有双歧因子的作用，他对 乳清、酪蛋白及人乳促进双歧杆菌生长 作用进行了实验研究。结果发现:大多数 用乳清喂养婴儿在第14天肠道内开始 有双歧杆菌定植，而酪蛋白组肠道内大 多数是类杆菌和肠球菌定植。提示乳清 中含有双歧因子。Balmer`6，的进一步实 验发现，人乳含有的乳铁蛋白较牛奶多。 Petschow，也用体外实验研究了人 乳、牛奶乳清蛋白和酪蛋白水解物对