大鼠透明质酸(HA)ELISA说明书.docVIP

大鼠透明质酸(HA)酶联免疫分析ELISA盒使用说明书—北京奇松生物科技有限公司 产品编号：QS42052 预期应用 ELISA法定量测定大鼠血清、血浆以及蛋清和蛋黄中透明质酸（HA）含量。 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定中水平。用纯化的包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入、，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 试剂盒组成 酶联板：一块 标准：瓶，稀释液稀释稀释液稀释液ml/瓶稀释液1×10ml/瓶稀释液1×10ml/瓶l/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A 1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液l/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。稀释方法同检测溶液A。 底物溶液：1×10ml/瓶。 浓洗涤液1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 终止液1×10ml/瓶（N H2SO4）。 的采集及保存 1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。-20℃保存，但应避免反复冻融。操作步骤 试剂或样品稀释时，混匀。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。待测样品孔ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻混匀，37℃反应120分钟甩干每孔加100ul（取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液37℃,60分钟。 温育60分钟后，甩干洗板3次350ul/每孔，甩干。 每孔加100ul，37，0分钟，甩干洗板5次，350ul/每孔，甩干。依序每孔加ul，37℃避光显色分钟依序每孔加溶液50ul，终止反应。用酶联仪在4nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）： 1． 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加溶液及NH2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 2．为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内。洗板方法手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.ml注入孔内，浸泡1-2分钟根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。计算以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以，即为样品的实际浓度。 乘以 -100 nmol/L 说明 1．-20℃（较长时间不用时）；2-8（频繁使用时）。．浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。 酶联板Rat Hyaluronic acid (HA) ELISA kit Catalog No. QS42052 (96 tests) Intended use This immunoassay kit allows for the specific measurement of Rat HA concentrations in serum and plasma. Introduction Hyaluronic Acid (HA), also called hyaluronate or hyaluronan, is a mucopolysaccharide widely distributed throughout the body. HA is produced mainly by fibroblasts and other specialized connective tissue cells. As a free molecule, HA can be found in the plasma and synovial fluid. HA is quickly removed from circulation by specific receptors present in sinusoidal cells (SEC) of the liver; the estimated half-life in plasma is 5-6 minutes. Test principle This as