第3章植物胚培养(免费阅读).pptVIP

第三章 植物胚胎培养 胚、胚乳、子房、胚珠进行离体培养，使其发育成完整植株 第三章 植物胚胎培养 第一节 植物胚培养 第二节 植物胚乳培养 第三节 植物胚珠和子房培养 第四节 植物离体授粉 第一节 植物胚胎培养 第一节植物胚胎培养 胚的发育：植物在受精后就开始胚发育。由于胚处在胚囊中，胚囊可以供给胚发育的特殊营养物质。 胚的发育包括原胚时期-球型胚-心型胚-鱼雷胚-成熟胚。 胚发育越小，培养时就需要更多更复杂的营养物质。 第一节植物胚胎培养 体细胞胚胎 概念： 体细胞胚（胚状体）： 指在组织培养中起源于一个非合子细胞、经过胚胎发生和发育途径（经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期），形成具有双极性的胚状结构。 第一节 植物胚胎培养 胚发育可分为异养和自养两个阶段。 异养阶段:在此阶段,胚主要依靠胚乳及周围的母体组织吸取养分. 自养阶段:开始于心形胚后期，此时，胚在代谢上已能由基本的无机盐和糖合成生长所需要的物质. 种子的结构 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 （一）材料的选择与灭菌 （二）幼胚的分离及培养 第一节 植物胚胎培养 （一）材料的选择与灭菌 取材时期：大多数幼胚成功的实例证明，适宜于幼胚发育时期多为心形胚至鱼雷形胚。（在解剖镜下观察，摸索植物的授粉天数与胚胎发育的对应关系）。 操作：取回大田或温室里授粉受精后的植物子房，用70%的酒精进行表面消毒，再用0.1%氯化汞灭菌10-30min，用无菌水冲洗3-4次，即可用于胚的分离和培养。 次氯酸钠：5%的次氯酸钠处理10min用无菌水冲洗3-4次，即可用于胚的分离和培养。 第一节 植物胚胎培养 胚龄和胚的发育形态 一般认为胚龄是影响胚培养成功的关键因素之一。 1、球型胚:成苗少,苗发育不良,缺叶绿素,子叶不发生。 2、心型胚:叶小白色,真叶发生需3-4周,后面的生长也不良。 3、鱼雷胚:叶绿色,展开的子叶大,苗发育较前两时期好。 第一节 植物胚胎培养 （二）幼胚的分离及培养 幼胚剥离：幼胚剥离是关键的关键，幼胚是一种半透明、高粘稠状组织，剥离过程极易失水干缩，因此操作速度要迅速。胚柄参与幼胚的发育，取材时应带胚柄。 接种培养： 了解培养对象的特性，比如休眠、春化作用、胚萌发温度等。 第一节 植物胚胎培养 葡萄胚挽救的几个步骤图例： a.取材料 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 第一节 植物胚胎培养 基本培养基：MS N6 White等 糖的作用：蔗糖是最好的碳源之一，主要调解渗透压的作用 无机氮以硝酸盐、铵盐的形式存在可以提高钾和钙的浓度 氨基酸：谷氨酰胺刺激胚的生长；水解蛋白 维生素：促进幼胚的早期发育 植物生长调节剂 天然有机物：胚乳看护培养 第一节 植物胚胎培养 大麦离体胚，在含有同种胚乳的培养基中，对胚的生长促进。 大麦离体胚，在含有异种胚乳的培养基中，对胚的生长促进作用更强。 大麦×黑麦杂交胚，在含有大麦胚乳的培养基中，成苗率提高30-40%。 第一节 植物胚胎培养 温度：胚培养25-30℃ 光照：黑暗或弱光，光对胚胎发育有轻微抑制作用 第一节 植物胚胎培养 胚柄是一个短命结构，球形胚时期，胚柄发育成最大。 胚柄参与幼胚的发育 5mg/L赤霉素能有效的取代胚柄的作用 第二节 植物胚乳培养 植物胚乳培养 含义：将胚乳组织从母体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技术。 被子植物的胚乳是三倍体由两个中央极核与一个精核结合而成；裸子植物的胚乳是单倍体（由大孢子发育而来）。 第二节 植物胚乳培养 第二节 植物胚乳培养 12科，40多种。 蔷薇科：苹果，梨，桃。 禾本科：大麦、玉米和水稻。 茄科：枸杞、马铃薯。 第二节 植物胚乳培养 1、胚乳外植体的选择制备。游离核型期材料难以培养，而细胞型期的材料易于成功。从盛花期后胚乳组织进入细胞型期的是时间玉米为8-12天，小麦为8天，黄瓜为7-16天 2、胚乳愈伤组织的诱导及器官分化： （1）器官发生途径，先生成芽后生成根。 （2）胚胎发生途径，在愈伤组织上直接生成胚状体，后生成小苗。 第二节 植物胚乳培养 有较大的胚乳的种子，消毒剥去种皮，培养 胚乳外有粘性物质包裹的，消毒、去皮、去粘液，取出胚乳组织培养 有果实的种子，将果实消毒，切开幼果，取出种子，分离出胚乳组织进