第5章微生物的生长繁殖与生存因子(免费阅读).pptVIP

菌种保藏的原理： 　　首先挑选优良菌种，最好是采用它的休眠体（如分生饱子、芽饱等）。 　　其次要创造一个有利于休眠的环境条件，如：干燥、低温、缺氧、缺乏营养以及添加保护剂或酸度中和剂等，使之处于代谢极微弱、缓慢，生长繁殖受抑制的状态。不使其污染、退化、死亡。 菌种保藏的方法： 原则：能保持原种的优良性状不变，方法简便、经济。 （一）低温法（定期移植法） 斜面培养、液体培养及穿刺培养均可。细菌于4～6℃保存。芽孢杆菌每3～6个月移植一次，其他细菌每月移植一次。放线菌于4～6℃保存，每3个月移植一次。酵母菌于4～6℃保存，每4～6月移植一次。霉菌于4～6℃保存，每6个月移植一次。 （二）干燥法 将菌种接种到适当的载体上，如经灭菌的河沙、土壤、硅胶、滤纸及麸皮等。以砂土保藏法用得较普遍。通常放在干燥器内于常温或低温下保藏。芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、放线菌及霉菌均可用此法。 （三） 隔绝空气法 该法是定期移植法的辅助方法。它能抑制微生物代谢，推迟细胞老化，防止培养基水分蒸发，从而延长微生物的寿命。例如，用液体石蜡封住半固体培养物来保藏菌种。将待保存的斜面菌种用橡皮塞代替原有的棉塞塞紧，这样可使菌种保藏较长时间。 （四）蒸馏水悬浮法 这是一种最简单的保藏法，只要将菌种悬浮于无菌蒸馏水中，将容器封好便达到目的。球衣菌可用此法保藏。 （五） 综合法 利用低温、干燥和隔绝空气的综合作用，使微生物的代谢处于相对静止的状态，使菌种保存较长的时间。此法是目前最好的菌种保藏法。 先用保护剂制成细胞悬液(含细胞数目108～1010个/mL为宜)分装于安培管内，将悬液冻结成冰(-25℃至-40℃)。大量制备时于-35℃预冻l h，若只制备几管，用干冰、液氮预冻l～5min即可抽气进行真空(真空度在13.3～26.7Pa)干燥，待样品水分升华95％以上时，呈现酥丸状或松散的片状即可。若样品残留水分l～3g/（100g样品）时安培管可封口。置室温或低温保藏均可。 由于加速期和减速期都历时很短，可把加速期并入停滞期，把减速期并入静止期。 * 由于加速期和减速期都历时很短，可把加速期并入停滞期，把减速期并入静止期。 * * * 恒浊连续培养特点：基质过量，微生物始终以最高速率进行生长，并可在允许范围内控制不同的菌体密度；但工艺复杂，烦琐。 使用范围：用于生产大量菌体、生产与菌体生长相平行的某些代谢产物，如乳酸、乙醇等。 * * * ?1915年，McCrady首次发表了用MPN法 (最大可能数法) 来估算细菌浓度的方法， 这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法 [1]。目前，我国仍普遍将MPN法用于大肠菌群，大肠杆菌等的检测。因此了解MPN法的原理及局限性，对实验室的微生物检测及食品工业的微生物控制都有着重要的指导作用 。  MPN法 (最大可能数法) 1. MPN法的原理 因为细菌在样本内的分布是随机的，所以检测细菌时，可按概率理论计算菌数。如果每份接种样的细菌数平均值为Vl，每个接种管中进入k (k＝0、1、2……)个菌的概率Pn接近于泊松分布。 1915年，McCrady首次发表了用MPN法 (最大可能数法) 来估算细菌浓度的方法， 这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法 [1]。目前，我国仍普遍将MPN法用于大肠菌群，大肠杆菌等的检测。因此了解MPN法的原理及局限性，对实验室的微生物检测及食品工业的微生物控制都有着重要的指导作用 。  * * 在好氧处理中：在污（废）水生物处理中，在正常供氧条件下，好氧微生物和兼性厌氧微生物两者共同起积极作用；在供氧不足时，好氧微生物不起作用，而兼性厌氧微生物仍起积极作用，只是分解有机物不如在有氧条件下彻底。 在厌氧消化中：兼性厌氧微生物在污水、污泥厌氧消化中也起积极作用，它们多数是起水解、发酵作用的细菌，能将大分子的蛋白质、脂肪、碳水化合物等水解为小分子的有机酸和醇等。 兼性厌氧菌（反硝化菌）在污水处理中的脱氮作用： 蛋白质→氨基酸→ NH3 → NO3- → NO2- 　→ 　N2 ↑ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　反硝化作用 兼性厌氧微生物在污水处理中的积极作用： 农业方面 反硝化细菌，如某些假单胞菌、伊氏螺菌、脱氮小球菌及脱氮硫杆菌等，在通气的土壤和有溶解氧的水中进行好氧呼吸，在缺氧环境中又有 NO3-存在时，利用 NO3-作最终电子受体进行反硝化作用，使NO3-还原为NO2-，进而产生 N2，使土