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马齿苋中黄酮类化合物不同的萃取技术的比较研究采用紫外 - 可见分光光度法分析朱宏斌 王玉芝 刘宇轩 夏亚林 唐天摘要：马齿苋在中国是一种传统的食用和药用植物。黄酮类化合物是这种植物的主要活性成分之一。本文对五种马齿苋中黄酮类化合物的提取技术进行了研究和比较，包括微波辅助提取，超声波提取，回流提取，索氏提取和浸泡提取。结果表明，微波辅助提取最适合马齿苋中黄酮类化合物的提取，因为它提取效率高和提取时间短。找到的最佳提取工艺条件为：乙醇浓度为70% （v/v） ，料液比为1:50 ，提取温度为50℃，照射时间为9分钟。通过紫外可见分光光度法，显色体系NaNO2–Al (NO3)3–NaOH溶液进行定量分析。在最佳条件下，分析物的校准曲线线性相关系数大于0.9999 。平均回收率为102.6% ， RSD为1.13% （ N = 5 ） 。对八种不同生活习性的马齿苋进行了调查。总黄酮含量分别为7.16， 7.10 ，9.38 ， 6.82， 6.78 ，11.36 ，5.12 ， 1.76mg·g?1 。关键词：食品分析 马齿苋 黄酮类化合物 微波辅助提取 紫外可见分光光度法介绍马齿苋（马齿苋，马齿草）是一种常见的，肉质草本的一年生杂草，广泛分布于全球温带和热带地区（拉达克里希南等，2001 ；加尔蒂等，1999 ）。在中国几千年来它作为一种食用和药用植物。马齿苋营养丰富，富含蛋白质，碳水化合物，钙，钾，锌和钠（ 2008年Aberoumand ）。作为中国传统医药的一种，马齿苋是非常重要的，因为其特殊的医疗功能，它已被用于传统治疗血痢和外部疖疮，湿疹，丹毒昆虫和蛇咬伤（ Chen等2003; Zhang等2002; YAZICI等，2007 ; Palaniswamya等，2004） 。在许多中药材的有效成分中，黄酮类化合物是植物王国中最常见的化合物之一。黄酮类化合物已受到广泛关注，因为它们的物种数量的丰富性和有效性，在降低血脂，抗氧化，吸收胆固醇，抑制血栓形成，扩张冠状动脉等方面具有显著疗效（Deng等，2008年； DeSouzaetal ，2008；Suetal 2008；shao等，2007；Volpi and Bergonzini，2006；zhang，2007；Keith Keith等，2007 ）。近日，黄酮类化合物在医药和食品领域的发展已经成为研究的热点。黄酮类化合物和多糖类是马齿苋中含量最丰富有效的组件。据悉，在马齿苋中已发现 7种黄酮类化合物，包括槲皮素，山奈素，杨梅素，芹菜素，木犀草素，染料木素和染料木苷（ Chen等2003； Zhang等2007 ）。并具有很高的生物活性，高含量的黄酮类化合物的提取和分离在医疗、食品等行业是非常重要的。因此，研究马齿苋中黄酮类化合物的提取和测定技术是具有非常重大意义的。在传统方法中，从马齿苋中提取黄酮类化合物通常是通过浸泡和回流的方法进行提取。作为一个新兴的提取方法，超声波提取也被用于黄酮类化合物的提取（Jin等，2008；Chen等2008）。但不幸的是，马齿苋中的黄酮类化合物不能由上述方法充分地提取，由于提取液的杂质含量高和提取时间长，它在医药的发展中受到一定程度上的限制。因此，有必要开发一个更有效和更可靠的提取方法。微波辅助萃取似乎有希望实现这一目的。微波辅助提取法具有很强的穿透力，选择性高，加热能力强，溶剂消耗少，提取时间短，提取率高（Ganzler等，1990）的优势，并作为一种新的提取技术，它特别适合用于提取热敏性成分和天然活性成分（Chen等，2008）。在本文中，压力自控微波分解系统被用来从马齿苋中提取黄酮类化合物时可以将系统的温度控制在一定值。因此，它可以有效的避免热敏感的组分的损失。在本研究中，微波辅助萃取，一个简单而有效的方法，已经研制成功。同时，为了证明微波辅助萃取的优点，对各种方法提取黄酮类化合物的提取效率进行了比较。对药用植物中黄酮类化合物的含量测定的几种方法已被报道，包括薄层色谱法，高效液相色谱法，毛细管电泳法和紫外可见分光光度法。所有这些方法中，只有紫外可见分光光度法可用于测定总黄酮的含量。紫外可见分光光度法是在确定植物中总黄酮含量时使用最广泛的方法。在这项技术中，直接测定法和染色方法都是比较常见的，但显色方法比直接测定法更好，因为显色方法不受其它成分如多糖和皂甙的干扰。在这项研究中，我们提出了一个简单的方法，采用紫外可见分光光度法与NaNO2–Al (NO3)3–NaOH显色体系，以确定马齿苋中总黄酮的含量。材料和方法样品采集为了探讨不同月份采集的马齿苋中的总黄酮含量，本实验以三种不同的马齿苋样品作为实验材料。三个样品的中医（TCM）样品购自中国传统医药有限公司（湖南，中国）；一个中药样品于2007年8月收集，另一个中药样品采集于2007年