流式培训-B27-封闭抗体教案.pptVIP

主要内容 一、流式细胞仪简介 二、人类白细胞抗原（HLA-B27）中的临床应用 三、封闭抗体检测在临床中的应用 一、HLA-B27 HLA-B27抗原属于HLA-Ⅰ类抗原，由α和β两条肽链组成。 第6号染色体的HLA-Ⅰ类基因编码α链，15号染色体编码β链。 基本上表达在机体所有有核细胞上，尤其是淋巴细胞表面含量丰富。 目前，在HLA与疾病的关联研究中，较有临床应用价值的当数HLA-B27与强直性脊柱炎的关联。在诊断和鉴别强直性脊柱炎中有重要的应用价值。 （一）微量淋巴细胞毒法 1. 原理：待检的淋巴细胞表面的HLA-B27抗原与已知的HLA-B27抗体结合，在补体的参入下，导致细胞膜溶解，能透过染料使细胞着色，在显微镜下判断HLA-B27为阳性，不着色为阴性。 2.方法学应用评价： 该方法结果稳定，可靠，不需要特殊仪器，是目前通用的方法，一般实验室均可开展。 （二）流式细胞学法 1.原理：利用荧光标记的抗B27的单抗与淋巴细胞表面B27抗原结合，使细胞带有荧光强度，用流式细胞仪检测，判断B27抗原阳性或阴性。 2.方法学应用评价：优点：无须分离淋巴细胞，操作简便、快速、标本用量少，自动化程度高，特异性高，稳定性好，重复性高，结果判断准确，减少了人为因素的影响，为目前较为理想的方法 。缺点:是仪器昂贵，目前只在较大医院应用。 （三）荧光定量PCR 1.实验原理：