第三次试验2011(论文资料).ppt

实验三 气相色谱法测定合成冰片的含量 一、目的与要求 1、掌握气相色谱法测定中药制剂中成分含量的方法和原理。 2、熟悉气相色谱仪进行含量测定的操作过程。 二、基本原理 冰片为龙脑和异龙脑的混合物，具挥发性。因此本实验采用GC法，对合成冰片所含龙脑进行测定，并用内标法计算含量。 三、仪器与试药 1、安捷伦-6820气相色谱仪（FID）、 微量进样器。 2、醋酸乙酯（AR）。 3、水杨酸甲酯（内标）、 4、龙脑对照品（中国药品生物制品检定所）。 5、合成冰片（市售品）。 英文名： Methyl salicylate。 分子式：C8H8O3；分子量：152.15 。 折光率：1.535-1.538 。 比重：1.180-1.185. 熔点(℃)： -8.3； 沸点(℃)：222.2 溶解性：易溶于乙醇、乙醚、冰醋酸 英文名称： Borneol 别名： 樟醇,冰片,钓樟醇,Camphol 分子式：C10H18O；分子量：154.24 成分来源： 姜科植物姜 根茎　　 外观：白色六方形片状结晶。 熔点：203-208℃； 沸点：212-214℃ 比重：1.011-1.020。 旋光：左旋-37.9°，右旋+37.9° 溶解性：溶于乙醇、乙醚、石油醚、苯、甲苯、丙酮 药理作用： 有发汗、兴奋、镇痉、驱虫和腐蚀等作用。 龙脑 水杨酸甲酯 异龙脑 英文名称：Isoborneol 别名：异冰片醇 分子式：C10H18O；分子量：154.24 熔点：208-214℃； 沸点：212-214℃ 比重：1.011-1.020。 溶解性：溶于乙醇、乙醚、石油醚等有机溶剂 1、色谱条件 1）色谱柱：PEG-20000 30m×0.25mmID×0.35μm 2）检测器：FID检测器 3）柱温：初始130°C，以12°C/min升至180°C，保持2 min 4）后进样口载气温度：220°C，不分流 5）前检测器温度：300°C 6）载气：N2，柱前压：100KPa左右。 7）H2：50KPa 8）空气：50KPa 9）理论塔板数：按龙脑峰计算不低于10万 10）分离度：R 1.5 11）对称因子：T=0.95-1.05 四、实验步骤 2、实验用溶液的配制 1）乙酸乙酯 2）内标溶液配制： 精密称取水杨酸甲酯125mg，置25mL量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，摇匀，作为内标溶液。（C水 = 5μg/μL） 3）对照溶液配制：精密称取龙脑对照品5 mg，置10mL量瓶中，加内标溶液至刻度，摇匀，作为龙脑对照溶液。（C龙 = 0.5 μg/μL） 4）样品溶液配制：精密称取合成冰片50mg，置10mL量瓶中，加内标溶液使冰片溶解并稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。（C冰 = 5μg/μL） 3、测定 分别吸取上述各样品0.2μL，注入气相色谱仪，进行测定。 四、实验步骤 由3）得 A 标 龙 = XXXX A 标 内 = XXXX m 标 龙 =0.1μg m 标 内 =1μg 由4）得 A 样 龙 = XXXX A 样 内 = XXXX m 样 龙 = ？ m 冰 m 样 内 =1μg = 1μg 保留时间 （分钟） 峰面积 第三针 龙脑标准品 龙脑 4.448 9319 内标 4.719 8892 第四针 合成冰片样品 龙脑 4.434 4957 内标 4.699 5754 4、计算 四、实验步骤 标 标 标 标 有关计算公式 （1）：m龙 = f龙 ? A龙 m内 = f内 ? A内 因为龙脑与内标在同一溶液中，由公式（1）得出 （2）： = m龙 m内 ? f龙 f内 A龙 A内 = m龙 m内 ? A内 A龙 f龙 f内 对于对照品溶液 = m龙 m内 ? A内 A龙 f龙 f内 对于样品溶液 样 样 样 样 （3）：计算冰片中龙脑的百分含量（保留三位有效数字） = m龙 ? f龙 f内 样 A内 A龙 样 样 m内 样 ? 1、填空： 测定中药制剂中冰片含量时，多采用 方法。 气相色谱定量分析方法有 ， ，和 。 用高效液相色谱法建立中药制剂有效成分含量测定时，进行系统适用性试验的内容有 _________，__________和___________。 2、判断： （1）用气相色谱法对麝香进行含量测定是以麝香酮为对照品。 （2）GC法或HPLC法用于中药制剂的含量测定时，常采用内标法定量。 3、建立色谱法测定复方丹参滴丸中冰片含量的方法，并简述需要进行的各项工作。 方法原理:供试品加水溶解溶解，经过正丁烷萃取，萃取液加内标后注入气相色谱仪进行色谱分离，用氢火焰离子化