高效液相色谱全解.pptVIP

离子对AB具有疏水性，被非极性固定相提取 不同待测离子A1，A2…与B离子间成对能力不同，形成不同疏水性离子对，从而保留值不同 原理： 四、反相离子对色谱法（RP-IPC） 固定相为非极性键合相，流动相为含水溶液 用途：主要用来分离强极性有机酸和有机碱 常用离子对试剂：分离酸类和带负电荷物质，常用季铵盐 分离碱类和带正电荷物质，常用烷基磺酸盐 五、亲和色谱法（AC） 原理：利用生物大分子和固定相表面存在生化特异性亲和力，进行选择性分离 固定相：生物专一性配基+载体 流动相：一定pH的缓冲液 具有亲和力特性吸附的生物大分子相互作用而被保留；没有亲和力作用的分子不被保留。 用途： 蛋白、酶、抗体分离，生物和医药分析 第五节 HPLC分离条件的选择 1、涡流扩散： 一、HPLC中的速率理论 A=2?dp 其中dp—填充物平均粒径；?—填充不规则因子。 小颗粒、均匀的球形固定相，匀浆高压填充可减小A 液体流动相黏度小，室温操作，Dm小，uuopt, B/U较小可忽略 即：H = A + C u 一、HPLC中的速率理论 2、纵向扩散： B=2?Dm ? —称为弯曲因子，固定相对分子扩散阻碍情况 Dm—组分在流动相中的扩散系数 一、HPLC中的速率理论 3、传质阻力： Dm：流动相扩散系数；Ds：固定相