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两法检测海岛地区幼儿抗 【关键词】 乙肝表面抗体；电化学发光法；酶联免疫吸附试验 ［摘要］ 目的 分析电化学发光与酶联两法检测海岛-HBs的比较免疫检测抗-HBs两法方法学的特点。方法 应用电化学发光和酶联免疫吸附试验两种方法检测155例幼儿抗-HBs，同时进行灵敏度、线性、阳性率对比。结果 ECLIA法灵敏度 u/L，线性范围达1000 u/L，155例幼儿抗-HBs的阳性率为%，而ELISA法灵敏度为 u/L，线性范围800 u/L，阳性率仅为%。ECLIA法的批内、批间CV＜%，而ELISA法的批内、批间CV＜%。结论 ECLIA法敏感性高于ELISA法，线性范围宽、重现性好，能定量检测抗-HBs，尤其对部分幼儿低水平抗-HBs检测有较大的价值。 ［关键词］ 乙肝表面抗体；电化学发光法；酶联免疫吸附试验 目前，常规检测抗-HBs，主要是酶联免疫法，尤其近来电化学发光法以其敏感、自动化程度高、重现性好、快速、稳定等优点，在固相标记免疫测定技术上居领先地位［1］。有文献报道［2］乙肝病毒感染主要发生在婴幼儿时期，为此检测幼儿抗―HBs有重要的意义。因我县地处海岛，有独特的地理环境，所以用先进的ECLIA法测定我县155例幼儿抗-HBs水平，并用ECLIA法作对照，现报告如下。 1 对象与方法 检测对象 155例幼儿，男89例，女66例；年龄2~6岁。来自我县各幼儿园，这些对象都按“0、1、6”程序进行过乙肝疫苗接种。 ELISA试剂 由珠海亚利生物公司提供，用Bio-550酶标 {两法检测海岛地区幼儿抗-HBs的比较 http://欢迎您访问范--文.之.家} 仪、兰勃Ⅱ型洗板机。 ECLIA法 用瑞士罗氏公司ELECSYS 1010电化学发光仪及其相应各种配套试剂。 质量控制 ECLIA法测定时，用罗氏低、高定值质控品，批号162631，定值为 u/L、 u/L。ELISA法用卫生部临检中心质控品，浓度为30 mu/L，批号030231，质控测定结果都在标定值的允许误差范围之内。 方法 这些幼儿采用早晨空腹抽血3 ml，分离血清，立即用两法进行抗-HBs测定，另外每人还做HBsAg、ALT两个项目。 2 结果和讨论 两法抗体阳性率 155例幼儿，按ECLIA法以≥10 u/L为阳性，ELISA法以S/CO≥为阳性，结果见表1。表1 ECLIA和ELISA法测定抗-HBs结果表1显示，ECLIA抗-HBs阳性为128例，阳性率为%，而ELISA阳性为95例，阳性率为%，经χ2检验，χ2=，P＜，两法阳性率差异有非常显著性，ELISA法阳性率和2001年我市疾病控制中心用ELISA法对我县123例城乡儿童乙肝抗体调查的阳性率接近，但两法明显低于文献报道阳性率90%以上［3，4］。 两法结果比较 95例抗-HBs ELISA法阳性的标本，用ECLIA检测全部呈阳性，而128例ECLIA法阳性的标本，用ELISA法检测阳性仅为95例，说明有32例ECLIA法阳性而ELISA法测定呈阴性，也表明两法的特异性是相符的，但ELISA法的灵敏度明显低于ECLIA法，32例ELISA法阴性的标本，用ECLIA法测定显示抗-HBs浓度都在10~44 u/L，说明ECLIA法有较高的敏感性。 线性比较 将抗-HBs测定值1000~1400 u/L范围内的3份血清混合，重复测定3次，取其均值作为原倍血清的理论值，然后做6点倍比稀释，求两者相关性并进行回归分析。ECLIA回归方程：Y=+,R=，ELISA回归方程：Y=+,R=，ECLIA在2~1000 u/L范围内线性良好，ELISA在44~800 u/L范围内线性良好，可见ECLIA检测范围比ELISA宽。 灵敏度比较 用罗氏高值质控血清 u/L，进行一系列的倍比稀释，结果ECLIA法可以测到 u/L，而ELISA法在 u/L以下S/CO都≤，说明只能测到 u/L，两者灵敏度相差倍。 重现性试验 采取批内和批间差异来确定，用上述两法对低、中、高混合血清，批内试验平行测定20次，批间试验每天上、下午各测定一次，连续10天，结果ECLIA法批内CV分别为%、%、%，而ELISA法分别为%、%、%。ECLIA法批间CV分别为%、%、%，ELISA法批间CV为%、%、%。 试验结果表明ECLIA法检测抗-HBs阳性率明显高于ELISA法。文献［2］认为抵抗HBV感染的最低抗-HBs有效水平为10 u/L，因此那些抗-HBs浓度在10~46 u/L的幼