LC8_DET讲述.ppt

检测器 对检测器的要求 高灵敏度 可重现的设置 合适的带宽 快速或可变的时间常数 宽的线性响应 容易使用及保养 自我诊断功能 检测器的种类 可变波长紫外－可见光 光电二极管阵列 示差折光 荧光 电导 电流和脉冲安培 质谱 衡量检测器的指标 灵敏度∶ S = △R / △Q △R是检测器响应值的增量 △Q是样品量的增量 噪音∶ 没有样品时检测器的最大输出信号 漂移∶ 检测器在一段时间内响应值的变化 线性动态范围∶最大线性相应与最小检出限之比 最小检测限∶样品产生两或三倍于噪音信号时的浓度 信噪比∶S/N 注意∶最小检测限不是一个单纯的检测器指标。它实际上是评价整个色谱系统的指标，包括了色谱系统、分离机理、色谱柱在内的综合性指标，信噪比亦如此 紫外-可见光检测器 基于样品池(S)中的样品对光产生吸收，有信号差 如是可变波长检测器，还有分光系统(光珊) 比耳定律 光能量∶ P0 = 透过溶剂的光能量 P = 透过样品的光能量 光通量(透过率%)∶T=P/P0 吸光度∶ A = -log(T)= log(P0/P) 吸光度 = 单位吸光度 × 流动池长度 × 溶液浓度 即∶ A = abc 同紫外检测器灵敏度有关的因素 信号强度(S) 从比耳定律可看出 样品的种类 样品浓度及进样的体积 检测池的长度 所使用的波长，检测器的时间常数 噪音(N) 流动相 所使用的波长，灯的能量 检测器的时间常数 非检测器因素 - 电噪音，泵脉动等 紫外检测器的溶剂影响 不同种类溶剂有其截止波长 溶剂的质量好坏对其截止波长有影响 为何溶剂质量不好? 含紫外吸收的杂质 溶解在其中的氧气 缓冲液溶质的紫外吸收 背景吸收的影响 背景吸收减少线性范围 许多溶剂产生背景吸收 示差检测器的注意事项 不能做梯度实验 最大的池耐压是 100 psi 流速范围是 0.3 - 10 ml/min. 荧光检测器 荧光检测器滤光片分类∶ 近通 Short pass -低于特定点的所有波长可以通过 远通 Long pass - 高于特定点的所有波长可以通过 带通 Band pass - 在特定范围内的所有波长可以通过 电化学检测器 电化学检测器 随着化合物被氧化或还原，产生正比于浓度的电流 电导检测器 电导检测器 Thermo Finnigan MSQ? 质谱 Bench-top, 单四极杆 质量范围 (m/z), 2–1600 AMU 大气压离子化 (API) 离子溅射离子化 (ESI) 大气压化学离子化 (APCI) TCC-100恒温柱箱 TCC-100 – 主要特征 可选柱切换阀 大面积 Peltier 单元, 强制空气概念 低扩散淋洗预加热(没有安装, 可选) 柱识别系统 翻转向下的前盖 Summit? 系统的最好技术 UVD 170U紫外/可见光检测器 UVD 170U紫外/可见光检测器 同时获得4个波长完全灵敏度 波长范围200–595 nm 高效的光学可实现低噪声和高灵敏度 可编程波长开关 固化的氧化钬滤光片进行自动波长校正 可升级到光电二级管阵列检测器UVD 340U UVD 170U 紫外/可见光检测器 6,50 6,80 7,00 7,20 7,40 7,60 7,80 8,00 8,20 8,40 8,60 8,80 9,00 -2,0 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 30,0 35,0 40,0 45,0 Lot 34582 #1 Sample 1 UV_VIS_2 mAU min WVL:215 nm 0.810 1.316 1.365 1.002 Ratio to UV_VIS_1 信号比图可以指示杂质 光电二极管矩阵检测器 简称∶PDA(Photodiode Array Detector) 兼顾紫外检测器及可见分光光度计的信息 在收集色谱图的同时，得到光谱图 色谱峰的纯度鉴定，色谱峰的确认 任意波长的再处理 对PDA的要求∶ 色谱的灵敏度 光谱的灵敏度 光谱的分辨率 光电二极管矩阵检测器示意图 UVD 340U二极管阵列检测器 UVD 340U二极阵管列阵检测器 波长范围200–595 nm 不连续大面积二极管用于高的灵敏度的高的分辨率 高的光谱线性允许比较痕量不同水平的峰的光谱对于应于标准色谱峰 用固化氧化钬滤光片自动波长校正 UVD 340U二极管阵列检测器 -20 0 20 40 60 80 100 120 200 220 240 260 280 300 320 350 % nm 201.2 230.5 284.6 : 999.02 Spectra comparison of 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid and 2,4-Dichlorophenoxybur