環境微生物實驗報告-2.docVIP

一. 題目: 間接計數法 二. 原理: 間接計數法是將待測樣品(如飲用水、廢污水、食品、乳類及空氣等)予以培養計數，常用的方法為平板計數法，其原理是將一定體積的待測水樣經過適量的稀釋，以塗抹或倒碟(注入培養)於平板計數培養基培養24小時，由於一個微生物細胞可以成長一個菌落，在稀釋倍數已知的情況下，計算培養基上生成的菌落數目，便可知水樣中存活細菌總數。 三.目的 比較塗碟法和倒碟法之差異。 四.實驗材料與方法 實驗材料 : 錐形瓶、玻璃培養皿、三角彎棒、吸球、定量玻璃吸管、稱藥杓、酒精燈、試管蓋、玻棒、隔熱手套、簽字筆、稱藥紙 儀器 : 電子天平、高溫高壓滅菌釜、水浴鍋、無菌操作台、微風恆溫培養箱、菌落計數器 實驗方法 (1) 首先先配製培養液1000ml:23g=150ml:Xg 得X為3.45克。再一燒瓶中加入150ml的二段水和3.45克欲配製培養液之粉末，均勻搖晃後送入高溫高壓滅菌釜進行滅菌。 (2)取第7組的酵母菌液取1ml，做連續10倍稀釋，到10-6 。 (3)連續10倍稀釋後所得之稀釋液取些許測吸光值。 (4) 塗碟，取培養皿六個，各加入稀釋液0.1ml~0.2ml後均勻塗開後，倒蓋貼上標籤，送入37度培養箱，待隔天觀察菌落數。 (5)倒碟，等培養液完成後，平均倒在6個試管中，加入稀釋液各0.1ml均勻混合後，分別倒至6個乾淨的培養皿中，等待凝固後倒