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病理的特殊检查在诊断病理中的应用分析
【摘要】近年来,临床病理特殊检查技术日渐发达,为疾病的临床诊治水平的不断提升提供了良好的支持。当前的临床病例特殊检查手段越来越多,主要分为特殊染色检查、免疫组织化学检查、电子显微镜检查3大类,用于疑难病例的临床诊治,为后续确诊及治疗方案的制定提供科学依据。
【关键词】病理;特殊检查;诊断病例;应用
1特殊染色检查
特殊染色检查是临床病例检查中常用到的一类检查方式,主要包含了Elastica―VanGieson染色检查、Azan-Mallory染色检查、Kluver-Barrera染色、银染法检查及PAM、PAS染色检查5种检查方式[1]:
1.1Elastica―VanGieson染色此种检查方法是使用Weigert氏弹力纤维染色液将标本染色,染色完毕后使用盐酸酒精或者乙醇溶液分色处理,之后再用Weigert的铁苏木素将细胞核染色处理。分色处理的部分采用磷钨酸水溶液与磷钼酸共同强化染色处理,之后使用苦味酸水溶液进一步染色,此种染色检查方式可将接受检查的弹力纤维变成黑紫色,检验的肌组织呈现黄色、胶原纤维呈现红色。
1.2Azan-Mallory染色此种染色检查方式首先使用酸性复红对标本进行染色处理,之后采用磷铝酸进一步处理,再使用橙黄G、苯胺蓝及草酸混合液对标本染色,染色处理完毕后使用偶氮卡红及磷钨酸染色处理(Azan染色环节)[2]。此种染色检查方法将送检标本中的肌原纤维染为红色、胶原纤维变为蓝色,细胞浆则染为淡蓝色、黄色及红色。
1.3Kluver-Barrera染色首先使用Luxol Fast blue MBS的酒精溶液对检验标本染色处理,处理完毕后给予碳酸锂溶液分色处理,分色完毕之后,使用结晶紫溶液重复染色处理,之后会发现髓鞘变为蓝色,神经细胞、神经胶质细胞及尼氏颗粒等变为紫色,而标本中的红细胞则变为蓝绿色[3]。
1.4银染法此种染色检查方式首先将检验组织置于选定的银盐溶液中浸泡一段时间,浸泡完毕后使用焦性没食子酚及福尔马林溶液还原浸泡的组织,再用阴离子将其游离处理,之后置于神经原纤维之上染色处理,经过染色的组织变为黑色。银染法多用于细胞内嗜银颗粒及网状纤维染色检查处理。
1.5PAM、PAS染色PAM染色即为过碘酸乌洛托品银染色检查法,此种检查方式主要使用乌洛托品与硼砂、硝酸银共同制成的溶液与碘酸氧化组织之中多糖类物质产生的醛基共同将组织染色,可将组织肾小球系膜细胞及肾小球基底膜染色处理以便检查。
PAS染色方法主要是采用碘酸氧化组织中的多糖类物质产生的醛基及Schiff试剂染色处理,最终使组织中的结缔组织、糖原变为红色[4]。
2免疫组织化学检查
当前的临床免疫组织化学检查方式主要有荧光抗体检查、酶组织化学检查、酶抗体检查、荧光组织化学检查及放射性同位素检查等几种主要方式,检查特点及实际操作如下:
2.1荧光抗体检查此种抗体检查方式首先采用荧光作为标记抗体标记,之后使抗原产生抗原抗体反应现象,试剂检验时可根据标记的荧光所在位置检测出特殊抗原物质。此种检查方法中的荧光色素多采用异硫氰酸荧光素进行操作。
2.2酶组织化学检查首先,将组织切片摆放好,添加预先制好的酶基质,检验组织上的基质会在组织内部酶的促使下发生分解,产生出沉淀物、反应物,以验证组织内部是否有活性酶、酶的活性指数。利用此种检查方法,可通过观察活性部位的黑色情况进行判断。
2.3酶抗体检查此种检查方式首先使用过氧化酶等物质将组织抗体进行标记处理,在待检组织的切片之上产生抗原抗体反应,反应所产生的物质同事先准备好的过氧化氢、过氧化物酶共同放置,之后用3,3’一diaminobenzide显色处理,此种检查方式常用于电子显微镜检查操作之中。
2.4荧光组织化学检查将待检组织置于紫外线之下照射处理,组织中存在的特殊性质物质会发出荧光,此种方式主要根据紫外线原理进行检测,常用于肌质、儿茶酚胺及维生素A等物质的检测之中。
2.5放射性同位素检查采用放射性同位素作为示踪物,通过对使用的这些同位素在人体内部的位置变化、代谢现象及摄取情况分析病情以达到诊断目的。此种方式常常用到的同位素主要有3H、45Ca、32P等同位素。另外,此种检查方式常被用于电子显微镜检查之中。
3电子显微镜检查
电子显微镜检查是除特殊染色检查、免疫组织化学检查之外的另一种临床上较为常见的病历特殊检查方式。目前临床特殊检查常用的电子显微镜主要有扫描型与透射型两大类,其中以透射型电子显微镜最为常用。
检查之时,首先使用电子显微镜将组织切片固定好,之后进行染色处理,切片及染色过程中应尽量避免产生细胞结构转变及组织结构变化;规范将组织切片厚度
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