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茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠肝脏氧化损伤的保护作用研究
[摘要] 目的 探讨茵陈多糖对妊娠胆汁淤积大鼠肝脏氧化损伤的保护作用。 方法 采用随机数字表法将32只妊娠SD大鼠分为对照组、模型组、低剂量组及高剂量组,妊娠16周除对照组外均采用苯甲酸雌二醇注射法建立妊娠胆汁淤积大鼠模型,造模成功后低剂量组[50 mg/(kg?d)]及高剂量组[100mg/(kg?d)]分别给予茵陈多糖干预,1周后检测各组大鼠肝脏生化指标[血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、直接胆红素(direct bilirubin, DBIL)及间接胆红素(indirect bilirubin,IBLI)]及氧化还原酶[超氧化物歧化酶(erythrocuprein,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)、过氧化氢酶(catalase ,CAT)]活力变化。 结果 茵陈多糖干预1周后,低剂量组及高剂量组血清ALT、AST、ALP、DBIL及IBLI水平明显低于模型组(P 0.05),低剂量组及高剂量组间差异有统计学意义(P 0.05)。低剂量组及高剂量组肝组织匀浆MDA水平低于模型组(P 0.05),SOD、GPx,、CAT平高于模型组(P 0.05),低剂量组同高剂量组间差异有统计学意义(P 0.05)。 结论 茵陈多糖能够减轻妊娠胆汁淤积大鼠肝脏氧化损伤,发挥对肝功能的保护作用。
[关键词] 茵陈多糖;妊娠胆汁淤积;肝功能;氧化损伤
[中图分类号] R714.255 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)03(a)-0011-03
妊娠胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)是女性妊娠期间常见的并发症,ICP不仅引起孕妇肝脏功能损伤,胆汁酸的毒性作用也是不良妊娠结局的原因之一[1-2]。茵陈作为利湿退黄的中药在ICP的治疗中具有独特的功效,茵陈中具有多种有效成分,其中茵陈多糖是具有生物活性的组分之一[3]。本文就茵陈多糖对ICP大鼠肝脏氧化损伤的保护作用进行研究。
1 材料与方法
1.1 药品与仪器
茵陈多糖(课题组萃取提纯),超氧化物歧化酶(erythrocuprein,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)、过氧化氢酶(catalase ,CAT)检测试剂盒(南京建成生物功臣研究所),分光光度计(常州医用仪器厂)。
1.2 动物造模及干预
32只雌性清洁级SD大鼠由南方医科大学实验动物中心提供,鼠龄6~8周,体重(180±25)g,采用随机数字表法将其分为对照组、模型组、低剂量组及高剂量组,每组8只,分笼饲养,间断光照,定量给食,自由饮水。大鼠适应环境后模型组、低剂量组及高剂量组采用苯甲酸雌二醇注射法建立妊娠胆汁淤积大鼠模型,5 mg/kg苯甲酸雌二醇(1 mg/mL)颈部皮下注射,对照组大鼠给予等剂量生理盐颈部皮下注射,7 d后模型组、低剂量组及高剂量组大鼠毛皮黄染表示造模成功。高剂量组[100mg/(kg?d),100 mg/mL]及低剂量[50mg/(kg?d),50 mg/mL]别给予茵陈多糖生理盐水溶液腹腔注射,对照组及模型组每日腹腔注射等体积生理盐水,连续7 d。
1.3 标本采集
茵陈多糖及生理盐水干预7 d后在氯胺酮麻醉下开胸剪开心脏采集血液标本,低温分离血清,深低温冻存。开腹采集肝脏中叶组织标本,制备组织匀浆。
1.4 肝组织匀浆制备
大鼠肝脏组织标本冰盐水漂洗、剪碎,制备组织匀浆,匀浆介质为蒸馏水1 000 mL pH 7.4,EDTA-2Na 0.01 mol/L,Tris-HCL 0.1 mmol/L,0.8% NaCl溶液,蔗糖0.01 mmol/L,组织匀浆后低温高速离心,留取上清液待测。
1.5 标本检测
大鼠冰冻血清解溶后采用自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、直接胆红素(direct bilirubin, DBIL)及间接胆红素(indirect bilirubin,IBLI)水平。肝组织
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