课题1菊花的组织培养(用)ppt方案.ppt

本课题内容小结 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 四、实验操作 思考：高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？ 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 思考：培养过程中为什么需要进行光照？ 思考：在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 1、培养基的灭菌；（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒；（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作；（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 答案：在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程 答案：此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养 二、实验操作 （一）制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备 1、配置各种母液 ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量 2、配置培养基 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml ① 配制培养液 ② 调PH ③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 （二）外植体消毒 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液 （三）接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒， 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1、接种室消毒 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。 3、材料的切取和接种 * * * * * * * * 通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 组织培养 营养繁殖 压条 无性生殖 分裂生殖 出芽生殖 扦插 嫁接 课题1 菊花的组织培养 　　　　 是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 组织培养: 1、植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性: 思考： （一）植物组织培养的基本过程 全能性的原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 即单个细胞经细胞和细胞分化后仍具有发育成完整生物体的潜能。 ３、细胞的分化 ①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 ②过程： 如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统 2、细胞分化与细胞全能性的关系： 细胞全能性是细胞分化的基础， 细胞分化是细胞全能性的具体体现。 ③特点： （2）稳定性： （3）全能性： （1）持久性： 是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度 细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的 已分化的细胞，仍具有发育的潜能 ⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果（基因的选择性表达） ④结果： 形成不同的细胞和组织 ⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果（基因的选择性表达） ④结果： 形成不同的细胞和组织 （2）细胞的全能性 ①定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 ②原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质 已分化的植物细胞，仍具有全能性 4、实例 植物细胞＞动物细胞 5、全能性的比较: 受精卵生殖细胞体细胞 分化程度低的细胞分化程度高的细胞 6、植物组织培养 细胞离体 ①必要条件 一定的营养物质、激素和其他外界条件 ②原理: 细胞的全能性 离体的植物器官、组织、细胞（外植体） 脱分化 愈伤组织 再