HPLC法测定胡日查六味丸中羟基红花黄色素A的含量.docVIP

HPLC法测定胡日查六味丸中羟基红花黄色素A的含量 　　【摘 要】目的：提高药品质量标准。方法：采用反相高效液相色谱法测定该药中红花所含有效活性成分羟基红花黄色素A的含量。结果：羟基红花黄色素A在0.1304～1.304μg范围内呈良好的线性关系。回归方程为Y=2935395X-20646，r=0.9998。平均回收率为101.93%，RSD为1.21%。结论：该方法重现性好，专属性强，结果准确，可靠。 　　【关键词】反相高效液相色谱法；胡日查六味丸；红花；羟基红花黄色素A；含量测定。 　　【中图分类号】R286 【文献标示码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0665-02 　　胡日查六味丸（胡日查-6）收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》蒙药分册[1]。由诃子、木香、红花、黑云香、甘松、闹羊花等六味药组成，具消“粘”，清“协日”，止痛之功效，蒙医临床用于治疗“协日”性头痛，目赤红肿，“亚玛”引起的偏、正头痛。我们选方中臣药红花进行含量测定方法的研究，以有效控制该制剂的内在质量。据文献记载【2】红花具有活血通经、散瘀止痛之功效，其查尔酮类成分羟基红花黄色素A、黄色素A为活性成分。参照《中国药典》2005年版一部相关品种项下【3】的含量测定方法，选择羟基红花黄色素A作为指标成分，对本制剂中的红花进行了HPLC含量测定方法研究。经分析方法验证，表明该方法重现性好，专属性强，方中其它组分对羟基红花黄色素A的测定无干扰。 　　1 仪器与试药 　　1.1 SHIMADZVLC-10Avp，LC-10ATvp型泵，SCL-10Avp型控制器，SPD-10AVP型检测器，CLASS-VP色谱工作站。岛津UA-1700型紫外-可见分光光度计。 　　1.2 试剂与试药：甲醇、乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为高纯水。 　　1.3 对照品 羟基红花黄色素A对照品（批号：111637-200503），中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用。 　　1.4 胡日查六味丸样品（091014、091015、091016）由内蒙古中蒙医院提供。 　　2 方法学考察 　　2.1试验条件： 　　2.1.1 色谱条件： 　　色谱柱： Diamonsil（钻石）C18柱（250mm×4.6mm；5μm）、Phenomenex C18柱（250mm×4.6mm；4μm）。 　　流动相：A：甲醇-乙腈（19：2）B：0.7%磷酸溶液（以三乙胺调节PH值至6.0±0.1）；A：B（23：77）；流速：1.0 ml/min；柱温：40℃；进样量：20μl；检测波长为403nm。 　　2.1.2检测波长的选择：取羟基红花黄色素A对照品溶液，自200～600nm做光谱扫描。结果羟基红花黄色素A在404nm处有最大吸收，参照《中国药典》2005年版一部“红花”检测波长，选择403nm作为检测波长。 　　2.1.3 对照品溶液的制备：精密称取羟基红花黄色素A对照品2.62mg，置50ml量瓶中，加25%甲醇制成每1ml中含52.4μg的溶液，即得。 　　2.1.4 供试品溶液的制备：取本品适量，研细，取约2.0g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率 40KHZ）30分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液过微孔滤膜（0.45μm），即得。 　　2.2线性关系考察： 　　取羟基红花黄色素A对照品约5.61mg，精密称定，置50ml量瓶中，加25%甲醇? 人性化护理在急性心肌梗死患者中的应用 脑卒中后抑郁的生物―心理―社会模式护理对策 腹腔引流管口渗漏病人的护理 谈孕产妇的心理护理 中风后遗症的中医护理体会 PDCA循环在护理质量评估中的应用研究 心内科重症监护室患者的心理特点及护理体会 心理护理改善伴强迫症状精神分裂症患者社会功能的对照研究 压疮的护理与防治措施 康复护理对于脑血栓患者的临床效果分析 眼外伤病人的临床处置及护理 谷芙猓?⑾∈椭量潭龋?≡取＞?芪??.0、3.0、4.0、6.0、8.0ml，分别置10ml量瓶中，加25%甲醇至刻度，摇匀，各吸取10μl进样，按上述色谱条件测定，以峰面积对进样量进行回归分析，结果羟基红花黄色素A在11.22～89.76μg范围内呈良好的线性关系，回归方程为y = 25586x + 12449 r=0.9996。 　　进样量（μg） 积分值 回归方程 线性关系 　　22.44 581171 y = 25586x + 12449 0.9996 　　33.66 869910 　　44.88 1159827 　　67.32 1762518 　　8