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秋水仙素对花生的诱导研究 　　摘 要：研究用不同浓度的秋水仙素（0.002%、0.01%、0.02%、0.1%、0.2%）对花生种子进行不同时间（2h、4h、6h、8h、10h）的诱导处理，分析种子发芽率及生长速率受秋水仙素浓度和作用时间的影响，并对花生根尖细胞的倍性进行鉴定。结果表明：秋水仙素对花生种子的发芽率和生长速率有显著的抑制作用，抑制作用随秋水仙素浓度和作用时间的增加而递增；诱导花生多倍体的最佳作用浓度和作用时间为0.01%秋水仙素处理4h或者0.02%秋水仙素处理2h。 　　关键词：秋水仙素；花生；发芽率；生长速率 　　中图分类号 S565 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）12-0036-02 　　Induction Effect of Colchicine on Peanut 　　Mei Hui1 et al. 　　（1Department of Bioscience and Biotechnology，Wuhan Institute of Bioengineering，Wuhan 430415，China） 　　Abstract：With different concentrations of colchicine（0.002%，0.01%，0.02%，0.1%，0.2%）on peanut seeds of different time（2h，4h，6h，8h，10h）treatment induced，analysed the effect of colchicine concentration and action time of germination rate and the growth rate of peanut seeds，and also the root tip cells were identified.The results showed that there was significant inhibitory effect of colchicine on germination ratio and growth rate of peanut，and the inhibition was increased by increasing the concentration and action time of colchicine.The optimal concentration and time of induction of polyploid peanut is 0.01%/4h or 0.02%/2h. 　　Key words：Colchicine；Peanut；Germination ratio；Growth rate 　　多倍体在植物界广泛存在，多倍体植物由于染色体组加倍导致细胞内含物增加，往往表现出形态增大、营养物质增加、抗逆性增强等特点[1]。多倍体育种是植物育种的重要方向，已在白菜、西瓜、杨树等多种植物中广泛应用[2-4]。多倍体诱导常采用秋水仙素对植物种子或者生长点进行处理，处理效果因秋水仙素浓度、作用时间及植物种类、器官等而呈现差异，研究表明，经秋水仙素处理后，花生种子的诱导率和存活率均显著高于其它外植体[5]。花生栽培种为异源四倍体（2n=4x=40），包括两个染色体组[6]。本实验用不同浓度的秋水仙素对花生种子进行了不同时间的诱导处理，通过倍性鉴定及种子发芽率、生长速率的差异，找出最佳秋水仙素处理浓度及作用时间，为今后花生的多倍体育种及优良花生品种的选育奠定基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料及试剂 花生种子由中国农业科学院油料作物研究所惠赠；秋水仙素购自上海悠祥生化试剂有限公司；纤维素酶、果胶酶购自武汉市华顺生物技术有限公司。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 多倍体诱导 通过种子浸渍法用秋水仙素溶液处理花生种子进行多倍体诱导。用不同浓度秋水仙素与不同浸渍时间处理结合，找出秋水仙素与花生的发芽率及生长速率之间的关系。秋水仙素浓度为0.2%、0.1%、0.02%、0.01%、0.002%，处理时间为2h、4h、6h、8h、10h，秋水仙素溶液量浸泡种子即可，然后清水清洗后沙土培养致花生胚根长到6cm。 　　1.2.2 生长特性比较 沙土培养7d后，记录种子发芽率（样本数30个），每7d测量一次根部至顶端的高度，记录到第四周截止，比较不同处理组花生的发芽率和生长速率。 　　1.2.3 花生根尖细胞倍性鉴定 由于花生染色体小且数目多，不易采用传统染色体制片法数染色体数目进行倍性鉴定，此处采用单细胞DNA含量差异进行倍性鉴定。采用去壁低渗火焰干燥法[7]制作分散良好的花生根尖细胞装片，将干