蔓荆子中黄酮类成分的含量测定及应用前景课件.pptVIP

* 邻二酚OH 或3，4-OH OH- 黄色 极易氧化 深红色 绿棕色 O2 ? 碱液中不稳定 黄酮类化合物的提取与分离 黄酮类化合物的提取，主要根据被提取物和共存杂质的性质选择合适的提取溶剂。 游离黄酮苷元 黄酮苷类及极性大的苷元 氯仿、乙醚 丙酮、乙醇 方法： 1.乙醇或甲醇提取 2.热水提取法 3.系统溶剂提取法 原理：利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行萃取而达到精制纯化目的。 ③ ② ①溶剂萃取 E t 2 O 水层 C H C l 3 C H C l 3 E t 2 O 总黄酮苷 回收溶剂 EtOAc层 EtOAc(或 n-BuOH) 萃取 总黄酮 回收溶剂 层 萃取 水层 石油醚液(叶绿素, 蜡, 胡萝卜素等) 加入少量水、 石油醚萃取 黄酮苷(黄酮苷可用7%酚/水洗下) (酚)除去酚类 浓缩 液 水液 萃取 浓缩液 减压浓缩 D C B A A沸水洗 B沸MeOH洗 C 7%酚/水 D 15%酚/醇洗 活性碳 适用于苷类 活性碳吸附 至上清检不 出黄酮化合物 直 接 柱 色 谱 浓缩液 回收溶剂 醇提取液 MeOH或EtOH提取 原料 1.利用酸性强弱不同进行分离——pH梯度萃取 梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）后，依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH及4%NaOH水溶液萃取，来达到分离的目的。 分离： a. 聚酰胺色谱：分离羟基黄酮类化合物 原理： 氢键吸附理论 2.色谱法 吸附力的大小由酚羟基的数目和位置来决定: 酚羟基数目?，吸附?，Rf值 ?；反之, 亦然； 酚羟基的酸性?，吸附?，Rf值 ?。 洗脱剂有：水－甲醇－丙酮－NaOH水液－甲酰胺－脲素水溶液 ? 洗脱能力最弱 洗脱顺序规律：易?难 1)苷元相同：三糖苷双糖苷单糖苷苷元 2)酚OH数目越多，越难洗脱; 当酚OH数目相同时，酸性越弱的越易洗脱；能形成 分子内氢键者易洗脱， 3)不同类型黄酮: 异黄酮二氢黄酮黄酮黄酮醇 4)分子中共轭双键多者则吸附力强，难洗脱。如： 二氢黄酮查耳酮 聚酰胺色谱适用于分离极性和非极性物质，如：黄酮体、酚类、醌类、有机酸、生物碱、萜类、甾体、苷类、糖类、氨基酸衍生物、核苷类等。 尤其对黄酮体、酚类、醌类物质的分离，远比其它方法优越 * * * 黄酮体化合物是在植物中分布最广的一类物质，几乎每种植物体内都有，它们常以游离态或与糖结合成苷的形式存在，后者居多。它对植物的生长、发育、开花、结果以及抵御异物的侵入起着重要作用。由于其分布广且部分化合物在植物中的含量较高，而且多数化合物容易以结晶形式获得，所以它是较早被人类发现的一类天然产物 。在藻类、微生物、细菌中没有发现黄酮类化合物 古代因黄酮体具黄色，曾作天然染料应用。虽早期曾有日本学者认为：正是由于黄酮类化合物的普遍性而使得难于从中发现高活性的化合物。然而，目前仍有不少黄酮体应用于医药。 93 年止，黄酮类化合物共超过4000个 * 根据1）中央三碳链的氧化程度，2）B-环联接位置(2-或3-位)以及 3）三碳链是否构成环状等特点，可将黄酮类化合物分为 * 根据1）中央三碳链的氧化程度，2）B-环联接位置(2-或3-位)以及 3）三碳链是否构成环状等特点，可将黄酮类化合物分为 * * 游离苷元：可溶于CH3OH，EtOH，EtOAc，CHCl3等有机溶剂，极性小的 可溶于苯，Et2O，一般难溶或不溶于水，在水中溶解度主要取决于分子中极性集团的多少(OH多，则在水中溶解度增大)； 另外与分子平面构型有关：黄酮、黄酮醇类、查耳酮等属平面型分子，推砌紧密，分子间引力较大?难溶于水； 而二氢黄酮、二氢黄酮醇具有非平面构型，易极化，排列不紧密。分子间引力??有利于水分子进入?水中溶解度稍大。 * 由于黄酮类化合物多数具有酚OH，因此，纯的苷或苷元都较易溶于碱性有机溶剂，如：碱性水溶液、吡啶、甲酰胺、二甲基甲酰胺等，在结晶精制时，若一般溶剂加热难溶，可采用二甲基甲酰胺或吡啶溶解，然后加适量的水或醇使其结晶析出，从而达到纯化的目的。 酸性大小规律：slide里所示。 由于酚羟基数目及位置不同，酸性强弱也不同，如上所示， 可用于提取、分离及鉴定工作。如C7-OH和4’-OH因为处于C=O的对位，在p-π共轭效应的影响下酸性较强，可溶于Na2CO3水溶液中； 5-OH形成分子内氢键，故酸性较弱 * 1-位O原子所致 ∵O