2010年分子生物学复习要点.docVIP

第一章： 绪论 分子生物学狭义和广义概念 分子生物学作为所有生命物质的共性学科所遵循的三大原则：1）构成生物大分子的单体是相同的（共同的核酸语言(Nt) ，共同的蛋白质语言(aa)）2）生物遗传信息的表达的中心法则相同 3）生物大分子单体的排列（核苷酸，氨基酸）决定了生物性状的差异和个性特征。 生物学的三大发现：DNA 双螺旋结构的揭示、遗传密码子的破译以及信使RNA 的发现，奠定了DNA-RNA-蛋白质三者之间关系的基础。 第二章：基因概念的演变与发展 1、遗传学家摩尔根根据对果蝇的遗传试验提出了基因是：基因像念珠（bead）一样孤立地呈线状一样排列在染色体上，是具有特定功能、能独立发生突变和交换的、“三位一体”的、最小的遗传单位。 2、科学家们通过对噬菌体突变体与表型之间的关系的研究，提出了顺反子理论： 顺反子是基因的同义词，认为基因是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小遗传单位。在一个基因内可以发生突变、重组（交换）。 3、DNA是遗传的主要物质，它以两种方式携带遗传信息。1）以中心法则为基础的结构基因遗传信息。2）调控基因选择性表达的遗传信息，通过特地个DNA序列与特定的蛋白质或核酸的相互作用，开启或关闭某些基因的表达。4 4、DNA作为遗传物质的优点：贮存遗传信息大；双螺旋结构稳定，利于复制，便于转录；可以突变，以求不断地进化，方便修复以求稳定遗传；核糖2’-OH脱氧，使DNA在水中的稳定性高于RNA。 5、RNA分子与DNA分子在结构上的主要差异在：1)核苷中的核糖为2’非脱氧的OH基。2）碱基中没有T，只有U。3）RNA分子多为单链分子。4）RNA分子的化学稳定性差，易发生降解。5）在以DNA为主要遗传物质的生物中，DNA分子链长，数目少，而RNA分子链短，数目多。 DNA双链的特点：1）每一条单链具有5ˊ→3ˊ极性，两条单链极性相反，反向平行。2）两条单链之间以氢键相互作用。3）B-螺旋右手螺旋。4）存在大沟与小沟。 6、DNA双螺旋大沟的具有比较重要的生物学功能： 影响双螺旋结构稳定性的因素：氢键、磷酸酯键，生理条件下。Na离子可有效地屏蔽两条主链上磷酸基团的静电排斥力，碱基堆积力。 DNA的变性与复性：两条单链间氢键的断裂和重新形成。d.s.DNA →s.s.DNA溶液粘性降低,沉降速度加快 d.s.DNA→s.s.DNA 260nm处吸光度值上升 增色效应 （Hyperchromycity）。 9、变性温度：DNA双链在一定的温度下变成单链，将开始变性的温度至完全变性的温度的平均值称为DNA的变性温度。变性温度与以下因素有关：1）DNA分子的碱基组成和排列方式。2）对于较大的DNA 分子，片段长短对Tm值的影响较小。较小的DNA分子（小于100 bp），片段较短的Tm值小。3）变性剂的影响，通常有机溶剂分子，破环DNA分子的氢键，使Tm值降低。4）随着盐浓度的增加，Tm值增加。5）溶液的PH值。过酸或过碱的环境，均导致Tm值降低。 10、DNA的复性： 11、影响DNA复性过程的因素：1）阳离子浓度0.18~0.2M Na+可消除poly-dNt间的静电斥力，促进配对。2）复性反应的温度Tm-25℃可消除S.S. DNA分子内的错误局部配对和二级结构。3）S.S. DNA分子的长度S.S. DNA分子越长，扩散速度越慢，复性越慢4） S.S. DNA分子越短，扩散速度越快，复性越快。5）S.S. DNA分子的初始浓度。6）DNA分子中核苷酸的排列或核苷酸的复杂性重复排列序列的DNA分子较随机排列的复性速度更快。 12、在不同的生理条件下，DNA可能采取不同的二级结构形式，除了典型的B-DNA结构类型外，尚有A-DNA，Z-DNA。它们与B-DNA的主要区别是，没有明显的大沟与小沟。Z-DNA区的基因通常是不表达的。 13、除了正常的DNA双螺旋，在基因组中的DNA还有可能呈现三股螺旋和四股螺旋状态。三股螺旋DNA可能是分子内、分子间和平行三股螺旋。它具有的生物学意义：是阻止了调节蛋白与DNA序列的结合，关闭基因的表达。与重组交换有关。可作为分子剪刀，定点切割DNA；可能与RNA形成三股螺旋，是RNA参与基因表条调控的机制之一（P43）（Hoogsteen 氢键） 14、尽管到目前为止，尚未在体内发现四股螺旋，但根据真核生物着丝粒区和染色体末端序列的特点，均有形成四股螺旋的可能。所以他们可能具有比较重要的生物学功能。（如维持线性染色体末端的稳定性，与染色体的有丝分裂和减数分裂有关等）。 15、C值与C值悖论 16 、重叠基因 17、重复基因（？） 18、间隔基因（断裂基因），断裂基因概念的相对性，生物学意义。P63-64 内含子也可编码蛋白 外显子不一定编码氨基酸序列 有些真核基因