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1，3—二苯—1，3—丙二酮对环磷酰胺诱导骨髓微核的预防保护作用 　　[摘要] 目的 研究1，3-二苯-1，3-丙二酮（1，3-diphenyl-1，3-proanedione，DPPD）对环磷酰胺诱导小鼠骨髓细胞微核的保护作用和对小鼠骨髓细胞微核的影响。 方法 40只小鼠随机分为8组，分别为阴性对照组，环磷酰胺阳性对照组，环磷酰胺+DPPD低、中、高剂量组（62.5，250，1000 mg/kg），DPPD低、中、高剂量组（62.5，250，1000 mg/kg），每组各5只。DPPD各剂量组小鼠经口给药30 d，每天1次。环磷酰胺采用30 h经口灌胃染毒。第2次染毒6 h后，小鼠麻醉脱臼处死，检测小鼠骨髓细胞微核率（千分率）。 结果 与阴性对照组比较，环磷酰胺阳性组小鼠骨髓细胞微核率明显升高（P 0.05）；与环磷酰胺阳性组比较，环磷酰胺+DPPD低剂量组（62.5 mg/kg）小鼠骨髓细胞微核率变化不明显（P 0.05），环磷酰胺+DPPD中、高剂量组（250、1000 mg/kg）小鼠骨髓细胞微核率明显降低（P 0.01），微核抑制率分别为35.58%和61.54%。 结论 30 d经口给予DPPD对小鼠骨髓细胞微核率没有影响，DPPD对环磷酰胺诱导小鼠骨髓细胞微核具有一定的预防保护作用。 　　[关键词] 1，3-二苯-1，3-丙二酮；环磷酰胺；微核；保护作用 　　[中图分类号] R446.19 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（b）-0013-03 　　1，3-二苯-1，3-丙二酮（1，3-diphenyl-1，3-proanedione，DPPD），是存在于甘草根中的一种β-二酮类物质[1]，研究发现其具有化学防癌[2-4]、抑制DNA及蛋白质损伤、抗氧化[5]、抗炎症等多方面的功效。本实验室对其多年的研究发现，DPPD能够拮抗四氯化碳、可卡因、N-甲基甲酰胺等化学物质造成的肝脏损伤[5-7]。在以往研究的基础上，本研究对其遗传毒性进行评价，并探讨DPPD对环磷酰胺诱导骨髓细胞微核形成有无预防保护作用，提供DPPD临床应用的依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 　　ICR雄性小鼠，体重16～18 g，由北京大学医学部实验动物科学部提供，生产许可证号：SCXK（京）2011-0012，使用许可证号：SYXK（京）2011-0039。在恒温（21～23℃）、恒湿（45%～65%）、12 h明暗周期交替的动物饲养室，实验前小鼠先适应3 d，自由进食和饮水。 　　1.2 试剂 　　DPPD（批号：S26175 005），购自MERCK-Schuchardt，用1%（V/V）吐温-80水溶液配置成混悬液；环磷酰胺（批号，江苏恒瑞医院股份有限公司，用生理盐水溶解；甲醇（分析纯，批号，北京益利精细化学品有限公司；小牛血清，上海拜力生物科技有限公司。 　　1.3 仪器 　　AR2130/C型电子天平（210 g/0.001 g，美国OHAUS公司）；OLYMPUS显微镜。 　　1.4 方法 　　40只小鼠随机分为8组，分别为阴性对照组，环磷酰胺阳性对照组，环磷酰胺+DPPD低、中、高剂量组（62.5、250、1000 mg/kg），DPPD低、中、高剂量组（62.5、250、1000 mg/kg），每组各5只。环磷酰胺+DPPD剂量组和DPPD剂量组经口给予DPPD 30 d，每天1次，给药体积0.2 mL/10g。阴性对照组每天给予相同体积的1%（V/V）吐温-80水溶液。环磷酰胺采用30 h两次经口给药法，给药剂量40 mg/kg，给药体积0.1 mL/10g，小鼠给药第29天，环磷酰胺阳性组和环磷酰胺+DPPD剂量组经口给予环磷酰胺，间隔24 h后，第2次经口给予环磷酰胺，第2次给药6 h后，小鼠麻醉后颈椎脱臼处死。立即取股骨制备骨髓涂片，涂片自然干燥后用甲醇固定，经Giemsa染色，蒸馏水冲洗、晾干。采用双盲法阅片，每只小鼠计数1000个嗜多染红细胞，观察含有微核数的嗜多染红细胞数，以千分率表示微核数，并计算抑制率，抑制率计算方法：抑制率（%）=（致突变物对照组微核率-受试样品组微核率）/（致突变物对照组微核率-空白对照组微核率）×100%。 　　1.5 统计学方法 　　采用统计软件SPSS 13.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析，比较t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 DPPD对骨髓微核形成的影响 　　与阴性对照组相比，DPPD组小鼠经口给予DPPD 30 d，DPPD各剂量