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三白草不同药用部位不同提取物的急性毒性研究 　　[摘要] 目的 探讨三白草提取物对小鼠急性毒性，评价其安全性。 方法 采用健康昆明种小鼠，灌胃给药三白草不同药用部位不同提取物，三白草地上部分和根茎的95%乙醇提取物给药剂量范围分别为40.00～12.66 g/kg和4.50～1.42 g/kg，观察小鼠的活动和毒性反应，采用改良寇氏法测定半数致死量（LD50）；采用组织切片法观察小鼠的病变部位。 结果 三白草95%乙醇提取部位为三白草主要毒性部位，而挥发油和水提物基本没有毒性；三白草地上部分和根茎部分95%乙醇提取物的小鼠LD50分别为17.15 g/kg和3.15 g/kg；病变部位为肝细胞轻度变性，而肾脏、胸腺及大脑等其他脏器各组均未见明显病变。 结论 三白草95%乙醇提取物具有一定的毒性，临床应用时应予以重视。 　　[关键词] 三白草；急性毒性；LD50；药用部位 　　[中图分类号] R285.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（a）-0013-03 　　中药三白草系三白草科植物Saururus chinensis（Lour.）Baill.的干燥地上部分[1]，具有清热解毒、利水消肿的功效。部分专著记载三白草有小毒[2-3]，马兜铃酸及其代谢产物马兜铃内酰胺-Ⅰ能造成肾小管上皮细胞损伤[4-5]，三白草中含有马兜铃内酰胺-Ⅰ的同系物——三白草内酰胺、马兜铃内酰胺AⅡ等内酰胺类生物碱[6]。肉豆蔻醚和榄香脂素既是抗肝脏脂质过氧化的有效成分亦是致幻作用的毒性成分，肉豆蔻醚在一定剂量下可导致肝脏脂肪变性而坏死[7-8]。前期对三白草挥发性成分的GC-MS分析表明三白草挥发油中含有大量肉豆蔻醚和榄香脂素等苯丙素类成分，尤其是根茎部位，其相对含量高达33.16%[9]。同时，本课题组及匡蕾等[10]在三白草药效学研究时均发现有小鼠死亡。因此，本研究对三白草地上部分和根茎的水提物，95%乙醇提物和挥发油部位进行急性毒性研究，为临床的安全合理使用提供一定的依据。 　　1 仪器与试药 　　1.1 动物 　　健康昆明种小鼠，雌雄各半，18～22 g，由南京中医药大学实验动物中心提供，合格证号为SOXK（苏）2008-0010。 　　1.2 药品与试剂 　　三白草购自安徽省亳州药材市场（地上部分产地湖北，批号：080908；根茎产地湖北，批号：080701），经南京中医药大学陈建伟教授鉴定为三白草科植物三白草Saururus chinensis（Lour.）Baill.的干燥地上部分及根茎，化学试剂均为国产分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 供试液的制备[11] 　　分别称取三白草地上部分和根茎粗粉适量，加10倍，8倍量95%乙醇回流提取两次（第1次2 h，第2次1.5 h），合并提取液，减压浓缩、水浴蒸干后，用食用油-吐温-80-水（1∶1∶8）制成含生药4 g/mL的乳剂；同法制备三白草水提物，并制成含生药4 g/mL的乳剂；采用水蒸气蒸馏法提取三白草挥发油，并制成含生药10 g/mL的乳剂。 　　2.2 不同组分样品小鼠急性毒性预实验[11] 　　取体重18～22 g健康昆明种小鼠若干只，雌雄各半，随机分组，每组4只，禁食不禁水12 h。用5倍稀释的不同剂量三白草供试液灌胃给药，造成小鼠不同程度死亡，分别用0/4与4/4致死剂量组，递增或递减一定比例的剂量，再次实验，找出0%和100%死亡剂量的所在范围。 　　2.3 三白草醇提物的急性毒性实验[12] 　　取体重18～22 g健康昆明种小鼠110只，随机分成11组，每组10只，雌雄各半。分为三白草地上部分醇提物组，根茎醇提物组和空白对照组，实验前禁食不禁水12 h，于次日上午灌胃给药1次，根据预实验结果三白草地上部分最大和最小致死剂量分别为40.00、12.66 g/kg，确定给药剂量分别为40.00、30.00、22.50、16.88、12.66 g/kg，三白草根茎最大和最小致死剂量分别为4.50、1.42 g/kg，确定给药剂量分别为4.50、3.38、2.53、1.90、1.42 g/kg，空白对照组灌胃等体积食用油-吐温-80-水（1∶1∶8）空白乳剂。常规饲养，连续观察7 d，记录动物反应及死亡情况。采用改良寇氏法计算半数致死量（LD50）及95%可信区间。 　　2.4 三白草水提物、挥发油最大给药剂量的测定 　　取健康昆明种小鼠50只，随机分成5组，每组10只，雌雄各半。分为三白草地上部分水提物组、地上部分挥发油组、根茎水提物组、根茎挥发油组和空白对照组，实验前禁食不禁水12 h，于次日上午灌胃给药1次，给药组按20 mL/kg小鼠体重灌胃给药1次，空白对照组灌胃等体积的蒸馏水。常规