实验二血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定by陈蔚文课件.pptVIP

醋酸纤维素薄膜电泳介质：醋酸纤维素薄膜，纤维素的羟基经乙酰化所形成的纤维素醋酸酯。溶于有机溶剂后涂成薄膜，具均一的泡沫状结构，有强渗透性。 电泳缓冲液：pH8.6的巴比妥缓冲液 清蛋白 pI=4.9 57%～72% α1 2%～5% α2 pI6 4%～9% β 6.5%～12% γ pI=7.3 2%～20% 球蛋白 ? 清蛋白 ?1 ?2 ? ? 清蛋白（albumin，A）：38～48g/L 球蛋白（globulin，G）：15～30g/L A/G：正常值1.5～2.5 ? ? 清蛋白 ?1 ?2 ? ? 加样线 加样线 纯化蛋白 对照 样品 【操作步骤】1．点样：取经巴比妥缓冲液浸透的2×8cm薄膜，滤纸吸去表面多余水分，在无光泽面距一端2cm处用铅笔划一加样线，写上编号。小滤纸片蘸取血清/样品，垂直压在加样线上，待样品渗入薄膜，无光泽面向下平贴在电泳槽支架的盐桥上，静置5～10分钟平衡。点样端置阴极，盖上盖子。2．通电：接通电源，调节电压为40～50V，通电2 ～ 2.5h，关闭电源，停止电泳。3．染色：薄膜浸入氨基黑B染色液2～5分钟。4．漂洗：取