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发酵工程实验报告 实验五 植酸酶酶活的测定 一.实验目的 1.复习酶活力的测定方法。 2. 鉴定摇瓶发酵的黑曲霉的产酶能力。 二.实验原理 植酸酶活性单位：样品在植酸钠浓度为5.0mol/L,温度37℃，PH5.5的条件下，每分钟从植酸钠中释放1umol无机磷，即为1个植酸酶活性单位。 在酸性溶液中正磷酸与钼酸作用生成磷钼酸，后者当有还原剂（如Vc）存在时，立即转化为蓝色还原物质，其最大吸收在660nm处。 三.试剂 1.乙酸缓冲液 2.植酸钠溶液 3.10%TAC 4.2.5%钼酸钠 5.10%Vc 6.17%硫酸 7.硫酸二氢钾（标准磷液） 8.显色液：（17%硫酸）：（水）：（2.5%钼酸钠）：（10%Vc）=1：2：1：1 四.实验步骤 1.先将实验所需溶液按相应浓度配置好。 2.标准曲线制作 （1）按表稀释磷溶液 水浴加热 将装好的溶液摇匀，放在37℃水浴锅中持续20min,冷却。 显色反应 测稀释液的吸光值 绘制标准曲线 3.样品中植酸酶活力的测定 （1）酶液制备：摇瓶液为试样，在离心机中以3000r/min转速离心15min，取清液 。 （2）酶活的测定 五.实验结果 1.取吸光度OD=3.159，将其替换为标准直线中的y=1.0579x-0.1094中的y值，得到x=3.0895，此值即为无机磷的质量。 2.由酶活的计算方法 酶活=F×m/30×31×V 其中V=0.3ml,F=1, 所以得到植酸酶酶活=11.07U/L 谢谢欣赏！ * * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 试管号 标准P液/ml 蒸馏水/ml 相当无机磷/ug 显色液/ml 1 0 3.0 0 3 2 0.2 2.8 2 3 3 0.4 2.6 4 3 4 0.6 2.4 6 3 5 0.8 2.2 8 3 6 1 2.0 10 3 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 在波长为660nm处测吸光值 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 以无机磷为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011
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