凝胶过滤层析20130510.pptVIP

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  • 2016-12-26 发布于广东
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可能遇到的一些情况 可能遇到的一些情况 谢谢! * * 凝胶过滤层析 张春鸽凝胶过滤层析是生化分离常用色谱技术的一种。 利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离,也被称为体积排阻层析(size exclusion chromatography)、分子筛层析(Molecular Sieve Chromatography)、凝胶渗透层析(Gel Permeation Chromatography) 定义 应用 凝胶层析法适用于分离和提纯蛋白质、酶、多肽、激素、多糖、核酸类等物质。 分子大小彼此相差25%的样品,只要通过单一凝胶床就可以完全将它们分开。 利用凝胶的分子筛特性,可对这些物质的溶液进行脱盐和脱色。 凝胶是一类多孔性高分子聚合物,每个颗粒犹如一个筛子。 当样品溶液通过凝胶柱时,相对分子质量较大的物质沿着凝胶颗粒间的孔隙,随着溶剂流动,首先流出层析柱; 相对分子质量较小的物质可自由地进出凝胶颗粒的网孔,使流量增长,移动速率慢而最后流出层析柱。 中等大小的分子在大分子物质与小分子物质之间被洗脱。 这样,经过层析柱,混合物中的各物质按其分子大小不同而被分离。 原理 典型的凝胶类型 琼脂糖凝胶:Sepharose和Bio-Gel?? 交联葡聚糖凝胶:Sephadex?? 丙烯葡聚糖凝胶:Sephacryl ?? 葡聚糖和琼脂

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