急性心肌梗死的临床生化指标及检测方法__培训课件.ppt

五、对病毒性心肌炎的诊断 一般应用心肌酶谱检查作为心肌损伤的指标，但其敏感性和特异性较差。cTnI仅在心肌特异表达，而CK-MB，AST，LDH非心肌细胞所特有，可产生假阳性。因而cTnI作为心肌细胞受损的敏感而特异的指标，在心肌炎早期诊断中具有很好的应用价值。造成cTnI升高早期与病毒损害有关，病程后期则与机体的免疫机制有关。 六、其他 烧伤患者心肌损伤诊断 骨骼肌损伤的鉴别诊断 甲状腺机能减退病人心肌损伤的诊断 血液透析、危重及创伤后病人心肌损伤的诊断 药物作用观察 问题及展望 cTnI 作为检测心肌损伤高度特异与敏感的指标，已广泛应用于临床诊断、风险分层与疗效观察等方面，且检测方法和技术不断更新，并日趋完善。但其目前仍面临一些问题，主要是检测方法尚未完全标准化以及质控手段的不完善，使不同检测系统的测定结果缺乏可比性。因此，在抗体的制备、参照物和检测试剂等许多方面均需建立统一的标准。随着在这方面研究的进一步深入，以及抗体制备及标记技术的不断进步，cTnI检测会有更广泛的研发及应用前景。 谢谢！ 新的CRP检测技术，如超敏乳胶增强试验，稳定、高灵敏，可检测CRP的微小变化，即超敏CRP (HS-CRP)。 * 2002年中华医学会检验学会在其公布的“心肌损伤标志物的应用准则”中建议: 将心肌肌钙蛋白(cTnT或cTnI)取代CK-MB成为检出心肌损伤的金标准。 二、心肌肌钙蛋白T 心肌肌钙蛋白T（ cTnT ）是20世纪90年代发展起来的一种新的诊断心肌缺血、坏死的高敏感性、高特异性的血清学指标。cTnT参与构成心肌调节蛋白，其结合于心肌细胞收缩器上，分子量为37000 D 。 AMI后2~3小时cTnT就升高，2~4天达到峰值，cTnT活性可较正常上限升高数十至百倍以上，12~14天下降至正常。在AMI后，cTnT升高幅度是CK-MB升高幅度的5倍，诊断AMI的绝对敏感窗口在cTnT也较CK、CK-MB宽，其中cTnT为10.5~140小时，而CK和CK-MB是9~31小时。鉴于cTnT浓度升高持续时间长，其对长期间诊断，对回顾性诊断都是非常适宜的指标。 最近研究发现，cTnT在骨骼肌损伤、肺部疾病、肾衰竭时也升高，其心肌特异性较心肌肌钙蛋白I（cTnI）低。 三、心肌肌钙蛋白I cTnI是心肌细胞所特有的一种收缩蛋白，仅存在于心肌收缩蛋白的细肌丝上，是一种单链多肤，分子量为22500 D。 肌钙蛋白I(cTnI)含有三个亚型:快反应型、慢反应型、心脏特异型。前两者与骨骼肌相关，后者仅存在于心肌中。cTnI与骨骼肌Tn的氨基酸序列显示40%不同源性，且cTnI肤链的N端增加了31个氨基酸，分子量为24 。cTnI在胎儿及健康或疾病状态的成人骨骼肌中不表达，因此具有高度心肌特异性，为cTnI作为心肌细胞损伤的特异性标志物奠定了基础。 在人心肌组织内cTnI的含量约为5mg/g湿重组织。生理状态下，cTnI以两种形式存在于心肌细胞内，少量cTnI (3%~5%)游离于细胞浆中以游离形式存在，为可溶性，大部分以结构蛋白形式固定于心肌肌纤维上，为不可溶性。 正常人血液中cTnI含量一般低于0.3μg/L，当心肌细胞胞膜完整性因缺血或缺氧等受到破坏时，游离的cTnI可迅速透过细胞膜进入血流，随着损伤加重，结合部分的cTnI被分解出来，成为游离的cTnI不断释放入血，导致cTnI持续升高。 四、比较cTnI和cTnT的诊断价值 比较cTnI和cTnT作为早期诊断心肌损伤的价值： cTnT在出现骨骼肌损伤、肾衰竭等疾病时也升高，而 cTnI分子量较小，正常血中浓度很低，心肌损伤后能快速释放入血液中，且呈百倍升高，且在血清中持续性存在; 因此，cTnI是目前效率最高的诊断AMI标志物。 2001年11月美国心脏病学会和心脏病协会提出测定cTnI作为诊断AMI和急性冠状动脉综合症危险分层的第一位标准。 在人类心肌损伤的诊断中，cTnI已经成为“金标准”之一。 心肌肌钙蛋白I的测定方法 一、化学发光免疫分析法 实验原理： 化学发光免疫分析法(CLlA)是化学发光法和免疫分析法结合的产物。它同时具有化学发光法的高灵敏度和免疫分析法的高选择性。 CLlA是用化学发光反应的试剂（可以是发光剂或催化剂等）标记抗原或抗体，标记后的抗原和抗体与待测物经过一系列的免疫反应和理化步骤（如离心分离，洗涤等），然后再加入氧化剂或酶底物，最后以测定发光强度形式测定待测物的含量。 基本类型： 化学发光免疫分析法根据其标记物的不同可分为三大类:直接标记化学发光物质的化学发光免疫分析、以酶为标记物的化学发光酶免疫分析和以电化学发光物质为标记物的电化学发光免疫分析。 实验材料： 待测血清； ALP-Avidin，Biotin，Su