固定化胰蛋白酶到多功能中间大孔核壳微球一个新的快速酶催化平台介绍.docVIP

胰蛋白酶固定到多功能介孔核壳微球：快速酶催化的新平台 摘 要 本研究通过将胰蛋白酶固定在多孔核壳Fe3O4 @ fTiO2微球上形成了一种简单、快速、有效和可重复使用的微波辅助胰蛋白酶消化系统。这种磁芯和二氧化钛壳纳米结构具有多种孔径（2.4和15 nm）（0.25cm3 g?1）（50.45 m2 g?1）（Cytc）β-乳球蛋白（β-LG）45s内被消化，并能通过质谱（MS）μL-1也可以测定。此外，45s微波辅助胰蛋白酶消化系统胰蛋白酶固定化微球重复使用5次后仍然有效10 μg小鼠脑蛋白的1715个特异蛋白质在经过45s微波辅助胰蛋白酶消化[1-3]。酶天然催化剂，质谱检测蛋白质的鉴定和翻译后修饰之前广泛应用于蛋白水解消化[4-6]。酶解是蛋白质组学中必要和关键一步，并且溶液和凝胶中蛋白质的水解是常用的蛋白质水解方法[7,8]。然而，通常由于劳动强度大，样品损失，酶的低稳定性，难回收，消化时间过长以及低浓度蛋白质的消化有限等使得酶解的应用受到限制[9-11]。因此，发展一种快速有效的蛋白水解方法实际生物医学蛋白质组分析非常重要[12]。随着纳米技术的迅速发展，各种纳米结构被开发用于载体以提高酶的稳定性和活性[13-17]。除了酶载体的组成，酶载体的结构在酶的固定化、酶活性和酶效率中也起着重要的作用[18,19]。特别是，大孔介孔材料能够作为有效的载体支载大量的酶，并能转运