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活细胞分析检测技术 常规染色法检测 FCM技术检测 MTT法检测 MTT法的应用 活细胞的检测 某些染料当细胞死亡时能透过变性的胞膜与解体的细胞核DNA结合，而令其着色。因而能鉴别细胞死活。 一、台盼蓝排除法 1．试剂： ① 4％台盼蓝母液：称取4g盼蓝，加少量双蒸水研磨，加水（双蒸）至100ml，离心后取上清液。 ② 1.8％氯化钠溶液。 步骤： 用前两液以1:1混合，制成2%台盼蓝液。再取1滴细胞悬液和1滴2%台盼蓝液混合，放盖片，置3分钟，镜下观察200细胞。活细胞不着色，死细胞核呈蓝色。计算百分比。 二、中性红排除法 步骤： （1）配1%中性红水溶液（双蒸水）。 （2）染前用Hanks液作10倍稀释，离心（1500转/分）7分钟，取上清为染液。 （3）将细胞悬液与染液4:1混合，混匀后加盖片静置15～20分钟。镜下观察。死细胞不着色，活细胞吸收中性红液，呈红色求百分率。 三、吖啶橙（AO）荧光染色法 （1）取少量血细胞、培养细胞或其它悬液细胞，数量在1×10级。 （2）滴加0.01吖啶橙（Acricline Orange, AO）生理盐水液1～2滴，加盖片后染色5分钟。（用0.1%吖啶橙水溶液与0.1M PBS以1:9混合）。 （3）荧光显微镜下观察，采取激发滤片BG-12（或BV），阻断滤片波长515nm士者。