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青岛农业大学
毕 业 论 文(设计)
题 目: WRKY13参与对植株生长ABA的应答
姓 名:
学 院: 生命科学学院
专 业: 生物技术
班 级: 2002
学 号: 20
指导教师: 刘 新 教 授
2014 年 6 月 1日
目 录
中文摘要………………………………………………………………………………………1
Abstract…………………………………………………...…………………………………....2
引言………………………………………………………………………………………….....4
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1菌株及载体
1.1.2 常用酶、化学药品、试剂盒
1.1.3 实验仪器
1.2 实验方法
1.2.1 材料培养
1.2.2 材料处理
1.2.3 培养基的配置
1.2.4 重组质粒的鉴定
1.2.5 根癌农杆菌(GV3101)感受态细胞的制备及转化
1.2.6 花芽浸蘸法转化拟南芥及阳性植株的筛选
1.2.7 气孔开度测定
1.2.8 实时定量PCR
2 结果与分析
2.1 葡萄WKRY13的异源表达植株的获得
2.1.1 p-Super1300-WRKY13重组质粒的构建
2.1.1.1 p-Super1300-WRKY13重组质粒的菌落PCR鉴定
2.1.1.2 p-Super1300-WRKY13重组质粒的酶切鉴定
2.1.2 p-Super1300-WKRY13重组质粒转入农杆菌菌落PCR鉴定
2.1.3 转基因植株的筛选
2.1.4 转基因植株的PCR鉴定
2.1.5 转基因植株的WRKY13基因相对表达量
2.2 葡萄WRKY13异源表达植株生长的变化
2.2.1 葡萄WRKY13异源表达植株的种子萌发率
2.2.2 葡萄WRKY13异源表达植株根系的生长
2.2.3 葡萄WRKY13异源表达植株主根的长度
2.2.4 葡萄WRKY13异源表达植株侧根的数目
2.2.5 葡萄WRKY13异源表达植株侧根的长度
2.3 葡萄WRKY13异源表达植株对ABA的应答反应
2.3.1 ABA对WRKY13异源表达种子萌发率影响
2.3.2 ABA对WRKY13异源表达植株根系生长影响
2.3.3 ABA对WRKY13异源表达植株气孔开度的影响
2.3.4 葡萄WRKY13异源表达植株ABA相关基因的表达量
3 讨论
葡萄WRKY13参与对植株生长调控及对ABA的应答
葡萄作为一种具有高营养价值和经济价值的果树,对探明其生长发育的机制,提高产量和品质具有极为重要的现实意义。转录因子和bscisic acid,ABA) 都能参与植株生长发育并且转录因子。本实验综合应用植物生理学分子生物学等现代生物学技术,获得WRKY13表达植株,探究了葡萄WRKY13对植物生长发育的影响以及对ABA的应答反应结果表明:葡萄WKRY13表达的种子萌发延迟,侧根数目增多并且种子萌发根系表现出对ABA的不敏感性,WKRY13异源表达ABA合成基因(ABA1、ABA2)信号途径的相关基因(ABI1、ABI3)的表达量,但显著。
葡萄WRKY13;脱落酸;生长发育
VvWRKY13 regulates plant growth and respon to ABA
Student majoring in biological sciences Sun changming
Tutor Prof. Liu Xin
Abstract: As a kind of high nutritional and economic value of fruit trees, grapes has very important practical significance to prove its growth mechanism and to improve the yield and quality. Previous study has shown that WRKY
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