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Induced Pluripotent Stem Cells 里程碑式的科学突破 2007年11月20日，日本京都大学的山中伸弥（Shinya Yamanaka)和美国威斯康星大学的詹姆斯·汤姆森（James Thomson）分别在《细胞》和《科学》杂志上发表重量级论文，宣布他们用基因改造的手段，将人类体细胞改造成了人类胚胎干细胞，在功能上几乎可以和胚胎干细胞相媲美。 干细胞 干细胞分类 成体干细胞 造血干细胞 造血干细胞是指骨髓中的干细胞，具有自我更新能力，能发育生成各种类型的血细胞。造血干细胞可以救助很多患有血液病的人们，最常见的就是白血病。 脐带血干细胞 间充质干细胞 神经干细胞 胚胎干细胞 诱导多功能干细胞（iPS） 2006年日本京都大学Yamanaka领导的实验室在世界著名学术杂志《细胞》上率先报道在小鼠皮肤成纤维细胞细胞中高表达上述四种转录因子，可诱导细胞发生转化，产生的新细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等都与胚胎干细胞极为相似；命名为诱导多能干细胞（Induced Pluripotent Stem Cells，iPS), 这一过程为从体细胞到干细胞的重编程。 1.Oct3/4 Oct-4（也称Oct-3）属于POU转录因子家族的一员。 是哺乳动物胚胎发育的一个关键的调控因子。是全能性的标志，它能够促使ICM形成、维持胚胎干细胞未分化前状态并促进其增殖。 2.SOX2基因 SOX2基因是编码转录因子的主控基因（master genes）家族的一个成员。转录因子是一些与DNA结合并调节其他基因表达的蛋白质 3.癌症基因c-MYC 癌症基因c-MYC，是一种最容易过度表现于人类的致癌基因，它对某些成体干细胞的自我更新起一定的作用，并可以抑制ES细胞的分化。 4.Klf4 Krueppel-like factor 4，KLF4上皮锌指转录因子Klf4 (旧称GKLF)调节体外细胞的增生与分化 iPS细胞诱导机制 2. Generation of iPS cells from Adult HDF Direct differention into Neural Cells Marker gene expression 已分化的细胞 导入病毒基因 Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4 病毒逆转录 胚胎干细胞培养条件和筛选 Ips细胞 24 factors 22 G418-resistant colonies whether clones possessed have ES cell-like morphology and proliferation properties doubling time of iPS was equivalent to that of ES cells ES cell markers (RT-PCR) RT minus: negative control , add everything except reverse transcriptase Nat1: loading control The promoters of Fbx15 and Nanog(Bisulfitegenomic sequencing) black points indicate methylated CpGs; white points indicate unmethylated CpG dinucleotides which of the 24 candidates were critical/important method:the effect of withdrawal/deletion of individual factors from 24 genes on the formation of G418-resistant colonies. result:identified 10 factors(3, 4, 5, 11, 14, 15, 18, 20, 21, and 22) Combination of these 10 genes alone produced more ES cell-like colonies than transduction of all 24 genes did Effect of the removal of individual factors from the selected 10 factors on the formation of G418-resistant colonies Combination of 4 factors identify 4 factors