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- 2016-12-30 发布于贵州
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病毒学的研究方法 分离技术 电子显微镜技术 组织和细胞培养技术 血清学方法 分子生物学方法 1、机械分离 过滤分离:过滤介质 固体颗粒大小 沉降分离:重力作用 密度差 离心分离:离心力 密度差 旋风分离:惯性力 密度差 静电除尘:静电场 使细颗粒带电 离心 常用于病毒的纯化 3、反应分离 可逆反应(如离子交换、反应萃取);不可逆反应(反应吸收、反应结晶);分解反应(生物分解、电化学反应、光化学反应)等。 二、电子显微镜技术 技术方法 负染色法 超薄切片技术 免疫电镜技术 冷冻电镜技术 三、组织和细胞培养技术 指从机体中取出组织或细胞,模拟机体内的生理条件在体外进行培养,使之生存和生长。 1、组织培养的原理 组织培养主要是为病毒易感的组织细胞提供一个良好的生存环境,使细胞对环境产生适应性,获得生长繁殖的能力。 细胞病变效应(CPE) 由病毒增殖引起的细胞改变,称细胞病变效应。 3、细胞培养的基本条件 细胞接种数:接种传代细胞一般为10—30万/ml 合成培养液:如Eagle氏液,RPMI1640,Eagle’s MEM。 酸碱度:细胞生长最适宜的PH范围是7.0–7.4。 温度:细胞培养的最适温度与细胞来源的动物体温一致。 无菌条件 培养器皿的处理 4、组织培养的优缺点 优点:可提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象,对疫苗
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