蛋白质的生物合成.docVIP

蛋白质的生物合成 一．蛋白质生物合成(protein biosynthesis)也称翻译(translation)，是生物细胞以mRNA为模板，按照mRNA分子中核苷酸的排列顺序所组成的密码信息合成蛋白质的过程。将核酸中 4 种核苷酸序列编码的遗传信息，通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序。蛋白质生物合成是基因表达的最终阶段。 1.反应过程：氨基酸的活化，肽链的生物合成（起始、延长和终止），肽链形成后的加工和靶向输送。 2.生物学意义：蛋白质合成在细胞生命过程中有至关重要的核心作用（生命必需和药物作用靶点）。 二．蛋白质生物合成体系： 1.基本原料:20种编码氨基酸。 2.三种RNA:mRNA---模板; tRNA ---适配器；核蛋白体---装配机。 3.主要酶和蛋白质因子:氨基酰-tRNA合成酶、转肽酶、起始因子、延长因子、释放因子等。 4.能源物质:ATP、GTP。 5.无机离子:Mg2+、K+。 三．mRNA的基本结构。 1.组成：5’-端非翻译区、开放阅读框架、3’-端非翻译区。 2.从mRNA 5’-端起始密码子AUG到3’-端终止密码子之间的核苷酸序列，称为开放阅读框架(ORF)。 3.顺反子:遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为。 四．遗传密码。 1.密码子（codon）：在mRNA的开放阅读框架区，从5’至3’方向，由AUG开始，每3个核苷酸为一组，决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号，称为三联体密码(有43个)。其破译在生物学史上有里程碑的意义。 2.有意义密码：能决定氨基酸的密码子（61个）。 3.起始密码子(initiation codon)：AUG。 4.终止密码子(termination codon) ：UAA、UAG、UGA。 5.特点：方向性(directional。翻译时遗传密码的阅读方向是5’→3’，即读码从mRNA的起始密码子AUG开始，按5’→3’的方向逐一阅读，直至终止密码子)、连续性(non-punctuated。编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码子及密码子的各碱基之间既无间隔、无重叠)、简并性(degenerate。一种氨基酸可具有2个或2个以上的密码子为其编码，存在“三中读二”的规律)、通用性(universal。从简单的病毒到高等的人类，几乎使用同一套遗传密码)、摆动性(wobble。转运氨基酸的tRNA的反密码子需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码反向配对结合，但反密码子与密码子间不严格遵守常见的碱基配对规律，称为摆动配对。通常出现在密码子的第3位碱基与反密码子的第1位碱基之间)。 五．核蛋白体的组成。 1.核蛋白体又称核糖体，是由rRNA和多种蛋白质结合而成的一种大的核糖核蛋白颗粒，是蛋白质生物合成的场所。 2.原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式：A位氨基酰位、P位肽酰位、E位排出位。 六．tRNA。 1.结构：二级结构三叶草型（由氨基酸臂、反密码环、DHU环、TΨC环组成），三级结构呈L型。 2.作用：运载氨基酸（氨基酸各由其特异的tRNA携带，一种氨基酸可有几种对应的tRNA，氨基酸的羧基结合在tRNA 3ˊ-CCA的位置（形成酯键），结合需要ATP供能）；充当“适配器”（每种tRNA的反密码子决定了所携带的氨基酸能准确地在mRNA上对号入座）。 七.重要的酶类。 1.氨基酰-tRNA合成酶：催化氨基酸的活化； 2.转肽酶(peptidase)：催化核蛋白体P位上的肽酰基转移至A位氨基酰-tRNA的氨基上，使酰基与氨基结合形成肽键;并受释放因子的作用后发生变构，表现出酯酶的水解活性，使P位上的肽链与tRNA分离； 3.转位酶(translocase)：催化核蛋白体向mRNA3’-端移动一个密码子的距离，使下一个密码子定位于A位。 八．蛋白因子（原核生物）。 1.起始因子：IF-1（占据A位防止结合其他tRNA）、IF-2（促进起始tRNA与小亚基结合）、IF-3 （促进大小亚基分离，提高P位对结合起始tRNA的敏感性）。 2.延长因子：EF-Tu（促进氨基酰-tRNA进入A位，结合并分解GTP）、EF-Ts （调节亚基）、EF-G （有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位移至P位，促进tRNA卸载与释放）。 3.释放因子： RF-1（特异识别UAA、UAG，诱导转肽酶转变为酯酶）、RF-2，（特异识别UAA、UGA，诱导转肽酶转变为酯）、RF-3（可与核蛋白体其他部位结合，有GTP酶活性，能介导RF-1及RF-2与核蛋白体的相互作用）。 九．能源物质（ATP和GTP）及离子（Mg2+、K+ 等）。 十. 氨基酸与特异的tRNA结合形成氨基酰-tRNA的过