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- 2016-12-30 发布于贵州
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一、血清谷丙转氨酶(SGPT)赖氏改良法
器材:试管及试管架、移液器或吸量管、恒温水浴锅、721型分光光度计、温度计、动物血清
试剂:
(1)0.1mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液:
①0.1mol/L磷酸氢二钠溶液:称取Na2HPO414.22g或Na2HPO4·2H2O17.8g溶
解于蒸馏水中,并稀释至1 000ml,4℃保存。
②0.1mol/L磷酸二氢钾溶液:称KH2PO413.61g溶解dH2O中,稀释至1000ml,
4℃保存。
③将0.1mol/L磷酸氢二钠溶液420ml和0.1mol/L磷酸二氢钾溶液80ml混和即
为0.1mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液。加氯仿数滴,4℃保存。
(2)标准丙酮酸(含丙酮酸2.0μmol/mL) :
取标准丙酮酸钠10mg,用上述缓冲液准确定容为50mL。此液须当日用当日配。
(3)SGPT底物液(含α-酮戊二酸2μmol/ml及DL-丙氨酸200μmol/ml) :
取α-酮戊二酸29.2mg,DL-丙氨酸7g ,用试剂1溶成100ml,在稀释到刻度前,以1mol /L NaOH调pH 7.4(因为转氨酶在pH7.3以下或7.6以上的环境中酶活性下降),加数滴氯仿防腐。此液于冰箱保存可使用4天。
(4)GOT底物液(DL–天冬氨酸200mmol/L ,α-酮戊二酸 2mmol/L):称
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