小麦幼苗过氧化物酶课件.pptVIP

生化实验 陈福龙 , 冯丽 2006.4.9 冯丽、石峰 实 验 九 小麦幼苗过氧化物酶 同工酶的提取、分离 一、实验目的： 1、掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和方法； 2、掌握同工酶的概念； 3、掌握实验试剂的配制 。 二、实验原理: 1、同工酶和电泳概念： 2、影响电泳的主要因素： 3、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 4、聚丙烯酰胺凝胶结构上的特点： 5、凝胶的质量决定因素： 6、不连续PAGE的原理： （1）三个不连续性的表现： (2) 不连续系统中的三种物理效应： （3） 浓缩效应产生的原因： ★ 二、实验原理: 1、同工酶和电泳概念： （1）同工酶指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 同工酶与生物的遗传，生长发育，代谢调节及抗性等都有一定的关系，如过氧化物酶在细胞代谢过程中与呼吸作用，光合作用，及生长素的氧化等都有关系，测定POD活性或其同工酶，可以反映某一时期植物体内代谢变化。 （2）电泳是指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 由有效迁移率μ＝mα＝qα/6πrη，则可推出： （1）带电颗粒的大小和形状： 颗粒越大，电泳速度越慢，反之越快； （2）颗粒的电荷数：