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DNA的粗提取与鉴定实验
一、教学背景分析
【教材分析】
生物体的性状之所以能够遗传给后代,是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。通过必修2《遗传与进化》的学习,学生已经学习了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据。那么DNA究竟是什么样的呢?本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理,使学生对DNA有一定的感性认识。
“DNA的粗提取与鉴定实验”在《普通高中生物课程标准》和《考试大纲》对实验内容考查的要求中属D级要求,新课标强调能力培养,高考对实验能力的考核比重也逐年加大。学生通过本次实验探究活动,可进一步提高动手能力和创新能力。
通过必修2《遗传与进化》的学习,学生已经了解了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据,知道生物体的形状之所以能够遗传给后代,是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。通过本课题的学习,使学生对DNA有一定的感性认识。
二、教学目标
【知识目标】
本通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。熟悉粗提取生物大分子的的一般性方法在实验过程中培养学生严谨细致、实事求是的科学态度DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理教学难点DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理
4.实验试剂。0.1g/mL柠檬酸钠 蒸馏水2mol/L 无水乙醇 二苯胺试剂
【学生准备】
1.预习实验“DNA粗提取和鉴定”,初步了解DNA的理化性质和基本形态特征。
2.进行分组。
3.查阅资料,了解DNA的取样的方法和来源
4.通过课前准备,学生进一步提高学习兴趣,再次激发实验探究的热情;较大程度上节省了课堂时间;为探究实验的成功打基础。
五、教学方法
【教法】 任务驱动法、直观演示法
【学法】 自主学习法、合作交流法 动手操作法
六、教学媒体
黑板、多媒体计算机
七、课时安排
该实验的操作简单,不需要大量繁杂的实验培养,调查等实验步骤,故两个课时就可超额完成。
八、教学过程
程序及时间安排 教师行为 预设学生
活动 设计意图 引入实验教学
3min DNA粗提取和定的实验步骤:(37分钟)
3.不需要破除细胞壁
选用鸡血细胞液还有一个好处——鸡血比较容易获得,那么我们为什么不用哺乳动物的红细胞呢?
哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核
问题:鸡血细胞液可以直接用吗?
柠檬酸钠抗凝
回答、思考 使学生明白为什么要选用鸡血细胞液为材料,深对探究性实验的过程及原则的理解 破碎细胞,释放DNA 去除滤液中的杂质
主要有RNA、核蛋白、多糖等
那么我们应该如何将DNA单独分离出来?
板书:去除滤液中的杂质
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
背景介绍;DNA的溶解性
图片:DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线
问题:
在什么浓度下,DNA的溶解度最小?DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?
在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14 mol/L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。
如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?
当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
用高浓度的盐溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。
第一步:
在浓度较高的NaCl溶液溶液中核蛋白容易解聚,游离出的DNA溶解在溶液中。
方法:在溶液中加入两倍体积的浓度为2mol/L的NaCl溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使DNA充分溶解。
板书:(1)溶解细胞核内的DNA
第二步:
加蒸馏水降低NaCl溶液浓度,使DNA析出。
方法:缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕。同时应注意控制加水量,使NaCl溶液的终浓度为0.14mol/L,直到溶液中丝状物不再增加时为止。
板书:(2) DNA的初步纯化
DNA的鉴定 用甲基绿溶液直接滴在有DNA丝状物的载玻片或玻棒上,呈蓝绿色反应。只用一种即可,不混合用。前者要加热,后者不加热 结束部分
10min
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