分子生物学第四讲.pptVIP

Requires no primer for polymerization 不需要引物 Requires DNA as template. 5’ ? 3’ synthesis Require Mg2+ for RNA synthesis activity lacks 3’ ? 5’ exonuclease activity, and the error rate of nucleotides incorporation is 10-4 to 10-5. 没有3’ ? 5’ 外切酶活性 usually are multi-subunit enzyme. 4、RNA polymerase 以DNA为模板，催化2个游离的NTP形成3’，5’-磷酸二酯键 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 识别不同起始点 σ因子 1 70000 rpoD σ ？ 核心酶 1 11000 ？ ω 用于DNA模板的结合 核心酶 1 155000 rpoC β β(催化)和β共同形成RNA合成的活性中心 核心酶 1 151000 rpoB β 核心酶组装，启动子识别 核心酶 2 36500 rpoA α 功能 组分 亚基数 相对分子量 基因 亚基 * PhD. Ming Jiang 分子生物学 分子生物学 转录 Transcription Semi-conservative mechanism (半保留机制) Replicons(复制子), origins(复制起始点) and termini(复制终点) semi-discontinous replication (半不连续复制) RNA priming (RNA引导) 复习上讲 Prokaryotic genome 原核基因组: single circular DNA = single replicon Eukaryotic genome 真核基因组: multiple linear chromosomes multiple replicons on each chromosome 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ Leading strand Lagging strand Okazaki fragment 半不连续复制 1、对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说，都可在DNA独特序列（ ）处观察到复制泡的形成。 复制起点 2、帮助DNA解旋的（ ）与单链DNA结合，使碱基仍可参与模板反应。 单链DNA结合蛋白(SSB) 3、在DNA复制过程中，连续合成的子链称( )，另一条非连续合成 的子链称为( )。 前导链 后随链 4、在DNA复制和修复过程中修补DNA螺旋上缺口的酶称为( )． DNA连接酶 5、DNA后随链合成的起始要一段短的( )，它是由( )以核糖核苷酸为底物合成的。 RNA引物 DNA引发酶 Proteins and enzymes of DNA replication DNA helicase (DNA解旋酶) single-strand binding protein (SSB, 单链结合蛋白) DNA primase (DNA 引发酶) DNA topoisomerase (拓扑异构酶，type I II) DNA polymerase (DNA聚合酶) DNA ligase (DNA 连接酶) Primosome (引发体) DNA复制过程中的一种负责专一性引发的多酶复合物，位于复制叉的前端，能够生成后随链冈崎片段合成必需的RNA引物，主要成分为引物酶（如DnaG）以及DNA解旋酶（如DnaB）等 DNA复制的方式 1、θ型复制 原核生物 2、 滚环复制 噬菌体 3、 D环复制 mtDNA （线粒体DNA） END OF REVIEW 转录 Transcription 转录 Transcription 一、基本概念 （RNA的酶促合成、转录信号等） 二、RNA合成的过程 三、原核生物和真核生物的转录 四、研究RNA的方法 这一章将要学习的内容： 1、转录（Transcription)的概念 在RNA聚合酶（RNA Polymerase）的催化下，以DNA为模板合成RNA的过程 。 The enzymic synthesis of RNA b