免疫血液自动化检测风险评估和确认研究免疫血液自动化检测风险评估和确认研究.docVIP

实验室质量控制 免疫血液自动化检测 风险评估和确认研究 免疫血液实验室检测已经从经典试管法的 1.1 ABO血型 方法学发展为应用各种技术和方法的自动 化系统。自动化系统可提高免疫血液检测 的效率，如缩短报告周转时间、结果解释 的标准化等。但免疫血液检测自动化要求 实验室在投入常规使用前对其进行风险评 估和确认/验证活动。 ABO血型测定是检测待检者血液红细胞上有无A和/或B抗原、和血浆或血清中有无抗A和/或 抗B抗体，前者称为正定型，后者称为反定型。ABO血型检测的原理是缺乏某种特定抗原的 个体，其血清内必定具有相应的抗体。这些抗体是天然产生的、可预期的抗体，称为ABO 同种血凝素，由抗-A、抗-B和抗-A,B组成。未实现自动化之前，常规ABO定型试验常采用 经典的试管离心法，无需孵育。表1展示了最常见的血型反应组合。当正定型和反定型结 果不符合时，应暂停ABO血型检测的结果发放和解释，调查不符合的原因。 首先，实验室必须明确自动化系统的性能要 求。性能要求可来源于当地和/或国家法规 要求，也可以是试验的临床用途确定。第 二，实验室应选择厂家声明能满足规定性能 要求的自动化系统。最后实验室需确认/验 证自动化系统符合厂家声明。只有完成以上 步骤，自动系统才可用于常规检测。 表1 血液定型试验和预期反应 正定型 反定型 ABO 存在的抗原 存在的抗体 抗A 抗B A细胞 B细胞 O A 无A和B抗原 A抗原 抗-A、抗-B、抗-A,B 抗-B 抗-A 无 B抗原 A和B抗原 注：“-”为阴性反应，“＋”为阳性反应。 一、免疫血液检测 1.2 Rh血型 1. 血型检测 Rh血型鉴定是指用抗-D试剂检测红细胞上有无D抗原。D抗原是Rh血型系统中的一个成员， 目前Rh系统包括46种抗原，其他的主要抗原有C、c、E、e。根据检测方法，D抗原检测可 能也需要试剂对照，这种情况下，对照液应包含与抗-D血清相当的蛋白质，通常为试剂中 除了抗-D以外的惰性成分，以检测红细胞的自发性凝集导致的假阳性结果。 血型检测指测定待测血液中有无血型抗 原，通常用抗血清检测特定红细胞抗原， 通过红细胞与抗血清的特异性反应表明有 或无相应抗原。例如，红细胞标本与抗A血 清反应表示有A抗原，即A+。血型检测有多 种方法，没有一种特定的抗血清或技术能 保证检出所有罕见、微弱或变异的抗原， 因此要谨慎选择最适合实验室特定要求和 标准的试剂和方法。 某些个体的D抗原表达减弱，其可能原因是是抗原位点的减少（弱D或Du抗原），也可能是 细胞外D表位的缺失（部分D抗原）。采用直接凝集法，用抗-D试剂检测这些个体的红细 胞时有可能出现假阴性结果。习惯上，弱D抗原指D抗原和抗D试剂在离心或37℃孵育后不 产生直接凝集反应，而仅与抗人免疫球蛋白试剂产生凝集反应。弱D试验在受血者中的作 用还不是那么肯定，但在供血者和D阴性母亲生的新生儿中弱D或部分D的检测是非常重要 65  实验室质量控制 的。这种新生儿需进行Rh免疫球蛋白预防 溶血。同样没有一种单独的方法或试剂能 通过直接凝集反应检出所有的D变异型，实 验室应审查试剂说明书或用户手册，明确 其能否适用本实验室要求的弱D试验。 性，应进行直接抗球蛋白试验。实验室应 自己确定用于明确抗体特异性的抗原阳性 和抗原阴性的试剂红细胞数目和组合。 自动化系统中，抗原抗体反应可能采用光 学/数字分析。通过比较红细胞的反应模式 和已建立的阈值，确定反应为阳性（+）、 阴性（-）或不确定性（？）。然后将反 应与程序化逻辑相比，得到检测结果的解 释，如表2和表3所示。 4. 交叉配血 血清学交叉配血试验为受血者血浆和供血 者红细胞之间的反应，是检出ABO不相容性 及临床上有意义的抗体的过程。如果抗体 筛查试验未检出抗体，且病人无特定抗体 过去史，则选择合适的ABO和Rh血型的红细 胞单位进行输血，可采用快速离心血清学 交叉配血检测ABO不相容性。如果检测到个 体有临床意义的抗体或者有同种抗体的过 去史，应选择无相关抗原的红细胞进行输 血。在这种情况下，血清学交叉配血方法 必须能检出有临床意义的同种抗体引起的 不相容。这些方法应包括37℃孵育阶段和 抗人球蛋白试验。实验室有责任明确此试 验的当地或国家法规要求。 1.3 其他红细胞抗原 其他红细胞抗原（表型）包括C（Rh2）、 c（Rh4）、E（Rh3）、e（Rh5）、JKa （JK1）、K（KEL1）等，目前多通过自动 化检测方法完成，后者适用于大量标本的 筛查。需要标本特殊红细胞抗原鉴定试验 的情况有：1）患者标本，以支持抗体鉴 定；2）供血者，为同种免疫性疾病患者输 血选择抗原阴性的红细胞单位。并非所有 的自动化系统都能进行RBC特殊抗原鉴定， 用户必须审查使用手册明确自动化系统的