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第二章:核酸的结构与功能 Structure and Function of Nucleic Acid 概述 核酸是生命最重要的分子之一 核酸的起源 核酸的发现历史 核酸生物学功能的研究 核酸的种类、分布与含量 本章主要内容: 核酸的组成成分 RNA的结构 DNA的结构 核酸及核苷酸的性质 核酸及其组分的分离纯化 核酸的分析测定及研究方法 RNA主要参与遗传信息的表达 而DNA则是遗传信息的载体 分类: 核酸是存在于细胞中的一类大分子酸性物质,包括核糖核酸(ribonucleic acid, RNA)和脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)两大类。 分布与含量: 分布: DNA:核98%,胞浆2% RNA:核小于10%,胞浆大于90% 含量:DNA含量相对恒定,RNA与细胞生长状态有关 核酸的组成成分 2.碱基(base) 嘌呤碱(purine): 碱基互变与碱基配对 3.核苷(nucleoside): 核苷是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物。 在大多数情况下,核苷是由核糖或脱氧核糖的1′位?-羟基与嘧啶碱N1或嘌呤碱N9进行缩合,故生成的化学键称为?,N糖苷键。 “稀有核苷”是由“稀有碱基”所生成的核苷 4、核苷酸的结构与命名 核苷酸(nucleotide)是由核苷与磷酸经脱水缩合后生成的磷酸酯类化合物,包括核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸两大类。 由于与磷酸基缩合的位置不同而分别生成2?-核苷酸、3?-核苷酸和5?-核苷酸。最常见者为5?-核苷酸(5?常被省略)。 核苷酸的分子结构 5?-核苷酸又可按其在5?位缩合的磷酸基的多少,分为一磷酸核苷(核苷酸)、二磷酸核苷和三磷酸核苷。 环核苷酸的分子结构 环一磷酸腺苷 环一磷酸鸟苷 核苷酸的命名及缩写符号 第二节:RNA的结构 一、RNA的类别及分布 二、 mRNA的结构与功能 三、 tRNA的结构与功能 四、 rRNA的结构与功能 一、RNA的类别及分布 RNA通常以单链形式存在,但也可形成局部的双螺旋结构。 RNA分子的种类较多,分子大小变化较大,功能多样化。 主要的RNA种类有rRNA、mRNA、tRNA、HnRNA、SnRNA、SnoRNA、ScRNA等。 二、mRNA的结构与功能 大多数真核成熟的mRNA分子具有典型的5?-端的7-甲基鸟苷三磷酸(m7GTP)帽子结构和3?-端的多聚腺苷酸(polyA)尾巴结构。 真核生物mRNA 5?-端帽子结构 真核生物mRNA 3?-端的polyA结构 mRNA分子中带有遗传密码,其功能是为蛋白质的合成提供模板(templet)。 mRNA分子中每三个相邻的核苷酸组成一组,在蛋白质翻译合成时代表一个特定的氨基酸,这种核苷酸三联体称为遗传密码(coden)。 三、tRNA的结构与功能 tRNA是分子最小,但含有稀有碱基最多的RNA,其稀有碱基的含量可多达20%。 tRNA是保守性最强的RNA。 tRNA是单链核酸,但其分子中的某些局部也可形成双螺旋结构。 (一)tRNA的二级结构: tRNA的二级结构由于局部双螺旋的形成而呈现“三叶草”形,故称为“三叶草”结构。 tRNA的“三叶草”形结构包括:氨基酸接受区、反密码区、二氢尿嘧啶区、TΨC区和可变区、额外区五部分。 (二)tRNA的三级结构——倒L形 四、 rRNA的结构与功能 rRNA是细胞中含量最多的RNA,占总量的80%。rRNA与蛋白质一起构成核蛋白体,作为蛋白质生物合成的场所。 在原核生物中,rRNA有三种:5S,16S,23S。其中,16S的rRNA参与构成核蛋白体的小亚基,而5S和23S的rRNA参与构成核蛋白体大亚基。 在真核生物中,rRNA有四种:5S,5.8S,18S,28S。其中,18S的rRNA参与构成核蛋白体小亚基,其余的rRNA参与构成核蛋白体大亚基。 大肠杆菌16S rRNA的二级结构 rRNA功能:催化作用 rPr功能:结构作用 DNA的结构 DNA的一级结构 DNA的二级结构 DNA的三级结构 DNA的一级结构 概念:脱氧核苷酸通过3’,5’—磷酸二酯键相连形成的线形结构 基因是DNA分子上最小的功能单位 一个DNA分子上的全套基因通常称为基因组 基因组中基因的排列顺序称为基因的顺序组织 一级结构的表示方法: 1、线条式: 5?-CAG-3? CAG pCpApG ApGpTp 2、字符式 一级结构的测定方法: Sanger双脱氧链终止法 DNA变性解链 加入标记引物、底物(dNTP)和聚合酶 合成互补链 dNTP正常合成 ddNTP终止合成 电泳鉴定 真
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