NMR实验技术题稿.pptVIP

* * 90年代中，一种与常规高分辨液相探头设计完全不同的超微量探头（目前称之为Nano NMR Probe，下同）问世了，这种探头与常规固体高分辨探头也不尽相同，后者为高功率，高速魔角旋转用于消除化学位移各向异性和使偶极偶合平均化，对于磁化率的不连续性是不考虑的。另外，常规MAS探头对线宽要求仅为5Hz（甚至50Hz），而1H微量探头因为1H核本身总的谱宽窄，要求线宽＜0.5Hz（CDCl3在丙酮-d6）中，特殊设计的Nano NMR probe，其成功之处在于将体积很小的样品（＜40μL），能100%地保持在检测线圈内，并确保填充因子高，和均匀的磁化率，以得到最高灵敏度，构成探头的物料也必须使磁化率的不连续性达到最小，才能达到最小的线宽。 超微量探头的结构原理 Nano NMR Probe内腔长28mm，魔角（54.7°），转速在1.5~2.0kHz之间，为保持长期稳定性，带有2H锁线圈，并有变温功能，探头种类有直接检测用的1H和13C{1H}和间接检测用的1H{13C}探头，样品体积最大为40μL，可取得线形好，灵敏度高和分辨率最佳的谱图，若样品量很少，溶剂量可相应减少，保持样品有一定浓度，溶剂杂质及伪峰不会增加，还可提高动态范围，只要氘代试剂的量能保证场一频联锁，即使样品溶液体积未充满整个样品管（40μl），也不会使匀场变坏，或使谱线变宽，确保取得高质量的谱图。 Nano NMR Probe的应用 微量样品的测定比较 样品量不同的薄荷醇,分别为为40μg，4 μg和400ng，溶于CD2CL2中,采样次数分别为4次,400次和32240次. 组合化学中的应用 组合化学是近二十年发展起来的一种快速合成与筛选大量化合物的新方法，其在发现和优化药物先导化合物的过程中发挥了重要作用。组合化学包括了组合合成、群集筛选和对感兴趣化合物结构解析的三大步骤。因而有“平行”合成技术、“混-分”合成技术、编码-解码技术、“一珠一化合物”技术、“位置扫描”技术、天然寡聚物的生物组合合成及筛选技术、“动态化学库”技术 、“多样性”导向的组合合成技术 、“Microarray”技术、组合配基装配、“非天然”天然组合化学库合成技术等等。 在多种合成方法中，“一珠一化合物”技术最大的优点是化学库的空间可分离性，亦即化学库中所有的化合物同时并存且相互独立，因而，这种树脂珠-化学库的方式可直接用于固相筛选法。 利用该技术在短时间内迅速合成并筛选的化合物可以达到几千万这样的天文数字，大大加快了发现药物先导化合物的步伐。但是在产物分析中，由于树脂引起磁场的不均匀，常规的NMR技术受到了限制。较早的做法是将反应的中间体或最终产物从树脂上切落下来，再利用常规方法进行分析和鉴定。这种方法费时，费样，而且经常破坏化合物的结构，得出错误的信息。 九十年代初发展的高分辨魔角核磁共振技术(High resolution magic angle spinning (HR/MAS)NMR) 可以克服树脂引起的磁场不均匀性 ,得到最高灵敏度和最小线宽的NMR谱图。该技术不破坏样品，可灵敏、直接地提供偶联在树脂上化合物的结构信息。 顶部谱图 用常规5mm液体高分辨探头 91．1mg干树脂，扫描一次 中部谱图：用常规5rnm固体CP／MAS探头 ，树脂样品为20.2mg．转速为3.8kHz，扫描8次 底部谱图：用Nano探头 ，树脂用量仅为5.4mg，魔角转速为2kHz，扫描8次 目前，广泛用于监测固相合成反应；指导反应条件的优化; 鉴定固载在单一树脂珠上化合物的结构；以及分析树脂上固载化合物的构象等等。高分辨魔角核磁共振是组合化学中有用的分析工具，可以跟踪固相有机合成反应，快速直接地提供连在树脂上的化合物的结构信息，指导反应条件的优化，它能直接简便地定量反应的产率，而这种分析方法恰恰在常规NMR中难以实现。 HR/MAS 1H NMR of Tetra-O-acetyl-β-D-galactopyranosylated Fmoc-Thr-CONH-TG and its H1 and H2 protons assignments H1 H2 HR/MAS 1H NMR of Tetra-O-acetyl-α-D-mannopyranosylated Fmoc-Hyp-CONH-TG and its H1 and H3 protons assignments. H1 H3 2).3mm，1.7mm微量探头 原理是提高样品浓度解决灵敏度问题。可提高灵敏度2倍左右。 3）超低温探头 利用高温超导薄膜材料而制成的超导低温探头，当样品温度由温控单元维持时，采用闭环或