2014-10-24ELIAS检测注意事项(霍爱梅)教程范本.pptVIP

1 标本的收集和保存 未抗凝血标本离心前一般自行凝集，不可用木棍等剥离凝血块。通常于室温（20－25℃）放置30－60min，血标本可自发完全凝集，析出血清；或37℃水浴20－30min，析出血清。 以3000r/min转速离心5－10min，使血清分离完全。 若过早离心，分离不全，血清中会残留部分纤维蛋白原，吸附于反应微孔，并且不易洗去，可与酶标记物非特异性结合，造成假阳性。 1 标本的收集和保存 （1）要注意避免出现严重溶血、脂血标本。 血红蛋白中铁卟啉具有类似过氧化物酶的活性，因此，在 以辣根过氧化物酶（HRP）为标记酶的ELISA测定中，如标本溶血，血清中血红蛋白浓度较高，则其很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的底物反应，从而产生非特异性显色。 脂血标本血清中大量的脂质小粒易黏附于反应孔内壁，非离子型洗涤剂(如乳化剂OP)难以洗去，易产生非特异性吸附干扰。 1 标本的收集和保存 （2）血清标本宜在新鲜时检测，要注意尽量避免细菌污染。 血清标本如在冰箱中保存过久，IgG可发生聚合，AFP可形成 二聚体，使本底加深，产生假阳性反应。 细菌生长所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解 作用；一些细菌的内源性酶可对以相应酶作标记的测定方法 产生非特异性干扰。标本在保存中如出现细菌污染所致的 混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。