《3.荧光光谱.pptVIP

第3讲 荧光光谱 荧光是怎么产生的？有什么用途？ 常用荧光光谱有哪些？荧光光谱有哪些特征？ 荧光强度和物质浓度是什么样的关系?还有哪些因素会影响到荧光强度？ 荧光光谱的有哪些光谱参数？ 有哪些实验方法？各种荧光测量方法有什么用途？ 2.常用荧光光谱 2).荧光光谱的特征 镜像规则的解释 4. 荧光光谱参数 1）荧光光谱参数： （ 2). 荧光各向异性 5. 荧光实验方法及其用途 荧光猝灭 荧光各向异性 荧光能量共振转移 时间分辨荧光光谱 荧光标记 双光子荧光光谱 （1）各向异性的时间相关特性 一般情况下，要用水合体积进行计算旋转相关时间。 如果是球形的样品，将会有单一衰减指数； 大多数情况将会有多个衰减指数。 原因主要是样品为非球形蛋白质或样品中有不同运动状况的荧光发色团。衰减时间与沿各分子轴的旋转相关。 如果样品内部某些片断是柔性的，衰减时间也会改变。因此荧光各向异性可用于研究蛋白的内部动力学。 能量转移也会影响各向异性衰减。 在膜蛋白的研究中，通过各向异性衰减也有很多信息。 5. 荧光标记 有些物质不发荧光，而且生化分子中如氨基酸中只有少数残基发荧光，成为内源荧光。 如染料与与研究对象结合，作为探针应用荧光方法与蛋白质结合后吸附在大分子上可以提供微区极性、疏水区大小、粘性、分子间距离等。 加入染料不应影响大分子