2008一轮专题复习资料 18基因工程(选修3).docVIP

新课标生物一轮复习资料 18-基因工程 【复习目标】 1、基因工程的原理 2、DNA重组技术的基本工具 3、基因工程的基本操作程序 4、基因工程的应用 5、蛋白质工程的原理 【考纲解读】 知识内容 要求 1、基因工程的诞生 2、基因工程的原理及技术 3、基因工程的应用 4、蛋白质工程 Ⅰ Ⅱ Ⅱ Ⅰ 【知识归纳】 一、DNA重组技术的基本工具 1．限制性核酸内切酶 （1）来源：原核生物 （2）在原核细胞中的作用：能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶（简称限制酶）。 （3）在工程中的作用特点 专一性：只能识别DNA分子中特定的核苷酸序列，且只能在每一条链中特定的部位进行切割，这种能被特异性识别的切割部位都具有回文序列，也就是在切割部位，一条链正向读的碱基顺序，与另一条链反向读的顺序完全一致。 （4）作用结果——形成DNA片段末端 黏性末端：错位切，切下后的两端形成一种回文式的单链末端 平末端：平切，在两条链的特定序列的相同部位切割，形成一个无黏性末端的平口。 （5）限制酶是一类酶，不是一种酶。 （6）作用实质：使特定部位的两核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 2．DNA连接酶 （1）作用实质：连接两DNA末端的单链之间形成磷酸二酯键，从而连接成一个DNA。 （2）常用种类及作用 3．基因进入受体细胞的运载体 （1）必备条件： ①对受体细胞无害，不会影响受体细胞正常的生命活动。 ②具标记基因。用肉眼是无法看到载体是否进入受体细胞，只有载体带标记基因才能对重组DNA是否进入受体细胞进行鉴定。 ③能自我复制。通过复制进行基因扩增。否则可能会使重组DNA丢失。 ④具有一个或多个限制酶切点。供外源基因插入其中，这些供目的基因插入的限制酶切点所处位置还必须是在质粒本身需要的基因之外，这样才不至于因目的基因（外源基因）插入而失活。 （2）常用运载体——质粒：裸露的，结构简单且独立于细菌、染色体、DNA之外的，具有自我复制能力的小型环状DNA分子。 二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取 （1）目的基因：主要是人类所需要的编码蛋白质的结构基因。 2．基因表达载体的构建——重组质粒的构建 （1）表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 （2）构建步骤 ①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有黏性末端的切口 ②用同种限制酶切断目的基因，产生相同的黏性末端。 ③将切下的目的基因片段，插入到质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒。 3．将目的基因导入受体细胞 （1）受体种类不同，导入方法不同 植物：农杆菌转化法，基因枪法，花粉管通道法 动物：显微注射法 微生物：感受态细胞法 （2）受体种类不同，所用的受体细胞种类也不相同。 植物：可以是卵细胞（受精卵）、体细胞（可经组织培养成为完整个体） 动物：受精卵（因为体细胞的全能性受到严格限制） （3）转化实质：目的基因整合到受体细胞染色体基因组中 4．目的基因的检测与表达 （1）导入检测：DNA分子杂交法（使用DNA探针） （2）表达检测 转录检测：分子杂交法检测mRNA 翻译检测：免疫法，提取蛋白质用相应的抗体进行抗体——抗原杂交 （3）个体生物学水平鉴定：如作物抗性等。 三、蛋白质工程与基因工程 项目 蛋白质工程 基因工程 区 别 过程 预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质 获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实质 定向改造或生产人类所需蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品（基因的异体表达） 结果 生产自然界没有的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现。 【典例精讲】 【例1】下列高科技成果中，根据基因重组原理进行的是（ ） ①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻 ②我国科学家将苏云金杆菌的某些基因移植到棉花体内，培育出抗虫棉 ③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒 ④我国科学家通过体细胞克隆技术培养出太空牛 A．①B．①②C．①②③D．②③④ 解析：植物杂交和基因工程所依据的原理都是基因重组，但基因工程中基因重组不同于杂交过程中基因重组，主要表现在不经过减数分裂和有性生殖过程，在人为控制条件下定向改变生物的变异。 答案：B 点评：本题考查几种高新技术所依据的遗传学原理。注意理解基因重组的内涵。 【例2】镰刀型细胞贫血症的病因