仪器分析实验设计方案2仪器分析实验设计方案2.doc

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仪器分析实验设计方案2仪器分析实验设计方案2

熏肉制品中亚硝酸盐含量的测定 【摘要】 以α-萘胺为显色剂,利用紫外可见分光光度计,探究实验的最佳条件(最大波长的测定,显色剂用量的选择以及显色时间的选取),绘制亚硝酸盐的标准曲线,测定熏肉制品中亚硝酸盐的含量。 【关键词】 肉制品,亚硝酸盐,紫外-可见分光光度法 【引言】 (一)熏肉制品与亚硝酸盐简介 肉制品是一类深受人民群众喜爱的食品,在其生产过程中多采用亚硝酸盐作为发色剂,它不仅能使肉制品保持良好的色泽,还能抑制肉毒梭状芽孢杆菌,保证肉制品的后熟风味。但近年来由于亚硝酸盐摄入量过多引起的食物时中毒时有发生,且加硝处理过的肉制品中的亚硝酸盐可与胺类生成强致癌物亚硝胺,对人体健康产生潜在的危害。 1 亚硝酸盐的性质 亚硝酸和硝酸的钠盐和钾盐常被加入用于腌肉的混合物中,用来产生和保持色泽、抑制微生物和产生特殊的风味。此外,亚硝酸盐(150-200mg/kg)可抑制罐装碎肉和腌肉中的梭状芽孢杆菌。亚硝酸盐的抗微生物作用为它使用于可能生成长肉毒梭状芽孢杆菌的腌肉中提供了正当的理由。亚硝酸盐含量只要控制在安全范围内使用不会对人体造成危害。肉制品中,亚硝酸盐含量不得超过30mg/kg,这是因为亚硝酸盐的中毒剂量是200毫克以上,而正常膳食中的亚硝酸盐即使是大量用亚硝酸盐做食品添加剂的肉类,也不会超过50毫克。 2 发色原理 亚硝酸盐在肉中形成一氧化一氮,而一氧化一氮与血红素类化合物作用生成亚硝酰肌红蛋白,这种色素产生了腌肉的红色。 3 中毒后症状 亚硝酸盐是不会蓄积在体内的,膳食中绝大部分亚硝酸盐随尿排出,不会对人体造成危害。过量亚硝酸盐进入人体,会氧化血液中的血红蛋白为高铁血红蛋白,后者无携氧功能,导致组织缺氧,引起肠原性青紫症,皮肤青紫是本病的特征,尤以口唇青紫最为普遍。口服亚硝酸盐10分钟至3小时后,可出现头晕、恶心、呕吐等症状。严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭,甚至死亡。 4 亚硝酸盐中毒作用机理 当血红蛋白中的铁处于+2(亚铁)并且缺乏配体键合所需的第6部位时它被称为肌红蛋白,是由珠蛋白和血红素组成的络合物,位居血红蛋白中央的铁原子(d2sp3)具有6个配位部位,其中4个分别被4吡咯环上的氮原子占据,第5个配位部位与珠蛋白的组氨酸残基键合,剩余的第6个配位部位可与各种配基提供的电负性原子络合。 亚硝酸盐为强氧化剂,进人人体后,可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白,失去运氧的功能,导致组织缺氧。 (二)亚硝酸盐的测定方法 为了有效的控制其毒性,检测其在食品中的残留量,目前常采用的测定方法主要有光度法、色谱法、电化学法。其中光度法又分为盐酸萘乙二胺法、格里试剂比色法、催化光度法、紫外光度法;色谱法中有离子色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法;电化学法又分为示波极谱法、伏安法。还有一些新的方法如化学发光法、荧光法、原子吸收光谱法等。 1 光度法 1.1盐酸萘乙二胺法 在弱酸性溶液中,NO2-与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物后,再与盐酸萘乙二胺偶联生成紫红色的偶氮染料,用分光光度法在540nm处测定,与标准曲线比较定量。 1.2格里试剂比色法 GB5009.033—2003测定方法中,其中一种方法就是格里试剂比色法,其原理是在弱碱性条件下,用热水从样品中提取NO2-,然后用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白,过滤后,在弱酸条件下,NO2-与对氨基苯磺酸发生重氮化后,再和N—1—萘基乙二胺耦合形成红色偶氮染料,最大吸收波长为538nm,所选择的显色剂不一样,最大吸收波长也有所不同。针对卫生标准的规定和工艺的不同,以及检测过程中pH、温度、放置时间对显色的影响,在检测肉制品中NO2-时,格里试剂比色法的准确性和稳定性均高于盐酸萘乙二胺法。另外用对氨基苯磺酰胺代替对氨基苯磺酸,其灵敏度、精密度均得到提高。 1.3催化分光光度法 主要原理是在一定的温度和酸性条件下,NO2-对KBO3氧化染料(或指示剂)而褪色的反应具有较明显的催化作用,且在一定NO2-的浓度范围内,吸光度变化与NO2-浓度成较好的线性关系,因此,可用该原理定量溶液中NO2-的浓度。 1.4紫外分光光度法 在稀盐酸介质中,NO2-与碱性品红发生重氮反应,用8—羟基喹啉作偶联剂,在弱碱性条件下,生成茶红色偶氮染料来定量测定NO2-含量。光度法是测定NO2-的经典方法,其检测所需费用较低,灵敏度较高,不经分离可直接同时测定样品中NO3-和NO2-,具有较好的选择性,操作简便。” 2 色谱法 2.1离子色谱法 主要原理是当淋洗液携带样品进入分离柱后,样品离子便与离子交换功能基的平衡离子争夺树脂的离子交换位置。经过多次竞争达到交换平衡。由于不同离子对树脂固定相的亲和力不同,通过淋洗液的不断淋洗,各种离子便先

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