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GC – MS的操作及应用 生物技术090 周立 2009019018 摘要：GC - MS 技术检测灵敏度高,分离效能好,使之在当前各领域的应用越来越受到重视。在中药和环境分析中的应用，给予了各种物质有效的测定方法。为保证GC – MS实验的成功率，应做好样品前处理等操作。根据所需结果做好相应的数据处理。 关键词: GC – MS；样品前处理；中药；环境分析 0 引言 气相色谱法( Gas chromatography , GC) 是近年来应用日趋广泛的分析技术,特别适用于具有挥发性的复杂组分的分离、分析,由于是以气体作为流动相,所以传质速度快,一般的样品分析可在20 - 30s 左右完成,具有分离效能高,灵敏度高的特点,在有对照品的条件下,可作定性、定量分析,但对重大事件或有争议的样品不能做出肯定鉴定报告,必须连接如质谱的检测器。另外对于不能气化的样品则需要作衍生化处理后再分析。质谱(Mass Spect rnum ,MS) 是强有力的结构解析工具,能为结构定性提供较多的信息,是理想的色谱检测器。气相色谱- 质谱( GC - MS) 联用利用了色谱的高分离能力和质谱的高鉴别特性,可对复杂的混合样品进行分离、定性、定量分析的一次完成,是一种完美的现代分析方法。 GC - MS 的常用测定方法:总离子流色谱法(total ionization chromatography ,TIC) ———类似于GC图谱,用于定量。反复扫描法( repetitive scanning method ,RSM) ———按一定间隔时间反复扫描,自动测量、运算,制得各个组分的质谱图,可进行定性。质量色谱法(mass chromatography ,MC) ———记录具有某质荷比的离子强度随时间变化图谱。在选定的质量范围内,任何一个质量数都有与总离子流色谱图相似的质量色谱图。 GC - MS 技术随着仪器的不断完善与发展,检测技术的成熟与推广,其应用范围越来越广。 1 GC – MS的操作 1.1 样品前处理 样品前处理是整个样品分析过程中至关重要的一个环节，据有关统计其大约占样品分析总工作量的70%左右，尤其对于基体复杂的环境和生物试样，样品顶处理必不可少。样品前处理的主要目的就是浓缩痕量目标物，降低最小检测浓度，除去干扰物，提高测定的精确度和灵敏度，通过化学衍生，提高被测物的灵敏度和选择性，消除对分析系统有害的物质，使仪器良好稳定运行，延长测试仪器的使用寿命[1]。 1.1.1 溶剂萃取 溶剂萃取是各类样品最常用的处理技术之一。液-固萃取(LSE)和液-液萃取(LLE)一直是应用最为广泛的样品前处理方法，但其缺点是要耗用较大量的有机溶剂并易引入新的干扰(溶剂中的杂质等)，还需要费时的浓缩步骤，易导致被测物的损失，造成空气污染，效率也较低。 1.1.2 固相萃取(SPE) 固相萃取是70 年代初发展起来的样品前处理技术，固相萃取主要用于复杂样品中微量或痕量目标化合物的分离和富集。例如，生物体液中(如血液，尿等)药物及其代谢产物的分析，食品中有效成分或有害成分的分析，环境水样中各种污染物的分析都可使用SPE进行样品预处理。该技术利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的[2]。 1.1.3 顶空技术 顶空法中有静态顶空和动态顶空. 由于顶空进样器很容易自动化, 因此和传统的化学前处理法相比, 具有操作简单,分析速度快, 结果重现性好等特点。典型的动态顶空法有两种。一种是先把载气吹出的挥发性目的成份吸附在捕集管上进行富集浓缩, 然后热脱附, 进入冷凝聚, 系统再浓缩, 最后快速加热导入气相色谱。另一种是将载气吹出的挥发性目的成份直接送到冷凝聚系统浓缩, 然后快速加热导入气相色谱。 1.2 数据处理 1.2.1 总离子色谱图 计算机可以把采集到的每个质谱的所有离子相加得到总离子强度,总离子强度随时间变化的曲线就是总离子色谱图（图9.21）,总离子色谱图的横座标是出峰时 间,纵座标是峰高。图中每个峰表示样品的一个组份,由每个峰可以得到相应化合物的质谱图；峰面积和该组份含量成正比,可用于定量。由GC-MS得到的总离子色谱图与一般色谱仪得到的色谱图基本上是一样的。只要所用色谱柱相同,样品出峰顺序就相同。其差别在于，总离子色谱图所用的检测器是质谱仪,而一般色谱图所用的检测器是氢焰、热导等。两种色谱图中各成分的校正因子不同。 1.2.2 质谱图 由总离子色谱图可以得到任何一个组分的质谱图。一般情况下，为了提高信噪比。通常由色谱 峰峰顶处得到相应质谱图。但如果两个色谱峰有相互干扰，应尽量选择不发生干扰的位置得到质谱。或通过扣本底消除其他组分的