三氧化二砷抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长及机制探讨.ppt

三氧化二砷抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长及机制探讨 复旦大学附属中山医院 刘厚宝 面临的 困境 胆囊癌的发病率逐年上升 大多数患者确诊时已属中晚期 切除率低 放化疗均不敏感 5年生存率5% 三氧化二砷 “Proud of China” “Ancient remedy performs new tricks” Science,1996,Aug 2（卷首语） 在血液系统肿瘤的基础和临床取得突破性进展 在实体瘤的研究领域颇受关注 2005年底被批准为治疗原发性肝癌的适应证 对胆囊癌有效？？？ 三氧化二砷和胆囊癌 两者之间的研究很少 国外 OVID,MEDLINE,ELSEVIER 共2篇，收录于BBRC 国内 中文科技目录 共15篇 临床应用 将As2O3用于4例中晚期胆囊癌患者，2个疗程，1例获得完全缓解（8个月） 钱军,秦叔逵,何泽明,等.三氧化二砷注射液治疗中晚期原发性肝胆癌的临床研究[J].中华肿瘤杂志,2001,23(6):487-489 目 的 本研究旨在观察As2O3对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其作用机制，期冀为将其应用于胆囊癌临床治疗提供理论依据。 免疫组化对Cyclin D1表达的检测 As2O3组Cyclin D1的蛋白表达量较对照组明显下降 免疫组化对Bcl-2表达的检测 As2O3组Bcl-2的蛋白表达量较对照组明显下降 Western Blot检测Bcl-2、Cyclin D1蛋白的表达情况 Cyclin D1 细胞周期进程的启动子 Cyclin D1 上升,更多细胞从静止期进入增殖期,肿瘤细胞增殖加快 Cyclin D1 下降,更多细胞从增殖期进入静止期,肿瘤细胞增殖减缓 文献报道：降低乳腺癌细胞 、肝癌细胞的Cyclin D1能使癌细胞生长、增殖及侵袭力下降 Bcl-2与胆囊癌 40 例原发性胆囊癌中28 例Bcl-2反应阳性 Bcl-2表达与在胆囊癌的分期密切相关 胆囊癌组织中细胞凋亡与Bcl-2表达密切相关 Bcl-2表达与胆囊癌发生发展密切相关 原发性胆囊癌组织中细胞凋亡与相关基因bcl-2和bax的表达[J].陕西医学杂志,2005,34(2)231～232 * * 中山医院普外科 细胞株的培养 收获细胞 动物模型建立 胆囊癌细胞 GBC-SD 复苏，转移，培养，观察生长情况 雌性裸小鼠 BALB/c-nu/nu 以0.5ml/只，皮下注射 ，观察瘤的生长情况 观察细胞生长至对数生长期 收获细胞，以NS配置成1×106浓度 材料与方法 中山医院普外科 材料与方法 10mg/kg 动物数 亚砷酸 亚砷酸组 阴性对照组 10只 iv，1次/d×7d 0.2ml/只 生理盐水 给药方式 10只 iv，1次/d×7d 中山医院普外科 体积 瘤重 Cyclin d1 Bcl-2 表达 每3天观察实验组及对照组的肿瘤体积 观察至21天处死裸鼠，测量瘤重，并计算肿瘤生长抑制率 免疫组化法测定两组肿瘤组织中Cyclin D1蛋白表达的情况 免疫组化法测定两组肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达的情况 材料与方法 中山医院普外科 材料与方法 公式： 　V(瘤体积)　=　a×b2 /2 (a为长径，b为短径) 结果在SPSS11.5软件下进行,两组均数之间进行t检验，P 0.05表示差异有显著性。 两组肿瘤体积的比较 结 果 中山医院普外科 结 果 组别 阴性对照组 亚砷酸组 动物数 瘤重（g） 抑瘤率（%） 10个 10个 0.992±0.401 0.526±0.269 46.98 两组肿瘤瘤重的比较 中山医院普外科 讨 论 本研究使用亚砷酸注射液10mg/kg实验，最终发现亚砷酸组的瘤体积和瘤重均较阴性对照组明显减小。其肿瘤细胞生长抑制率为46.98%。 说明10mg/kg剂量的亚砷酸能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长，亚砷酸对其起到抗癌作用。 中山医院普外科 中山医院普外科 细胞凋亡 细胞毒作用 端粒酶 其他 肿瘤血管 4. 抑制内皮细胞增生，抗肿瘤血管形成，抑制VEGF的表达 5. 影响肿瘤抑癌基因，癌转移基因的表达，影响肿瘤细胞的细胞周期等 1. 上调细胞凋亡促进基因如Bax，Fas等的表达，下调抑制基因如Bcl-2等的表达 2. 选择性的抑制肿瘤细胞增殖，并使其破碎坏死 3. 抑制端粒酶活性 亚砷酸（As2O3）抗癌作用的可能机制 As2O3 讨 论